LABOREXPO 2022: Příprava vzorků pomocí automatu Freestyle ve forenzních a toxikologických analýzách

Již více než dvacet let se zabývá německý výrobce laboratorních přístrojů LCTech GmbH vývojem, výrobou a prodejem přístrojů pro automatizaci přípravy vzorků před analýzou organických analytů chromatografickými metodami.

FREESTYLE paří mezi nejuniverzálnější automaty pro přípravu vzorků na trhu a dokáže automatizovat několik různých i vzájemně provázaných technik pro přípravu vzorků. Jednou z těchto technik je i obousměrná extrakce na pevnou fázi (SPE), která je používána při zpracování biologických vzorků ve forenzních a toxikologických analýzách. Obousměrná extrakce zahrnuje nasátí vzorku od spodní části extrakčního lože v SPE kolonce směrem nahoru a následné protlačení vzorku sorpčním ložem v protisměru směrem shora dolů. Tato technika zajistí důslednou interakci analytů se sorbentem a snižuje množství rozpouštědla potřebného pro extrakci analytů z SPE kolonky. Automat FREESTYLE nabízí technické uspořádání bez možnosti kros-kontaminace vzorků. Vzorky lze po extrakci následně sbírat do laboratorního skla pro jejich následné použití pro další analýzy.

Tato extrakční technika obousměrné SPE je užívána pro viskózní biologické vzorky jako je např. krev, moč, mozková tkáň při analýzách léčiv nebo zakázaných látek při dopingových kontrolách.

Výrobce LCTech

• na trhu od roku 1993 jako distributor produktů Pickering
• německý výrobce specializovaný na instrumentaci pro přípravu vzorků při analýzách organických sloučenin před chromatografickou analýzou a při přípravě vzorků pro analýzy mykotoxinů

Nabídka LCTech

Automatický robotizovaný systém Freestyle

• SPE, GPC, zakoncentrování vzorků, přímý nástřik na LC kolonu

Příprava vzorků před analýzou POPs

• automaty pro přečišťování vzorků, zakoncentrování vzorků

Systém pro gelovou permeační chromatografii

Materiál a přístroje pro stanovení mykotoxinů

• Spotřební materiál pro přípravu vzorků při stanovení mykotoxinů
• Fotochemický reaktor pro derivatizaci aflatoxinů
• Rychlotesty ELISA
• Vakuový manifold

HPST: Materiál a přístroje pro stanovení mykotoxinů LCTech

LCTech Freestyle

• Základní jednotka, kterou lze doplňovat různými typy modulů
• Robot X,Y,Z
• Dávkovací pumpa
• Dávkovací smyčka
• Distribuce rozpouštědel
• Dávkovací jehla s dvojitou stěnou
• Držáky pro sklo v přední části přístroje

Dávkovací jehla

• Dvojitá stěna pro dva nezávislé vstupy kapalin
• Podél stěny jsou otvory v úhlu 360°
  • určeno na oplach prostoru, ve kterém je jehla aktuálně umístěna
  • možnost odstranění vzduchu během plnění skla vzorkem
• Speciální tvar špičky jehly (septum nezničí, po vytažení jehly je zachováno)

HPST: LCTech Freestyle - Dávkovací jehla

Držáky pro sklo v přední části přístroje

• Uživatel si libovolně umístí zvolený držák do přístroje a uloží do metody
• Lze je ohřívat nebo chladit
• Lze dávkovat i do odměrných baněk
• Víko pro vialky, do kterých se přímo eluují frakce z SPE (1, 4, 16 ml)

HPST: Držáky pro sklo v přední části přístroje LCTech Freestyle

Moduly k Freestyle Basic

• Freestyle SPE
• Frestyle ThermELUTE (příprava vzorků pro mykotoxiny)
• Freestyle HPLC Direct Injection
• Freestyle EVA
• Freestyle GPC
• Freestyle XANA, Freestyle QuEChERs (specifické aplikace

Systém pro přípravu vzorků při analýzách

• Krmiv
• Potravin
• Vzorků životního prostředí
• Léčiv
• Návykových látek atd.

Freestyle SPE

• SPE modul
• Pohyb po ose Z
• Univerzální pro všechny typy SPE a IA kolonek
• Řídící jednotka pro SPE modul

HPST: LCTech Freestyle SPE

• Kolonky od 1 do 15 ml

• Imunoafinitní kolonky 1 a 3 ml

  • kolonky jsou zavíčkovány a připraveny k okamžitému použití

• Skleněné kolonky s maximálními rozměry 105 x 17,5 mm (délka x průměr)

• Tlaková (pozitivní) extrakce ve všech krocích, kde je aplikována kapalina

• Jeden držák pro všechny typy SPE kolonek (umístění kolonek je optimalizováno pomocí adaptérů)

HPST: LCTech Freestyle SPE - Držák na SPE kolonky

• SPE kolonka může být posunuta do kterékoli části systému
• Standardně 3 typy rozpouštědel
• Možnost rozšíření na 6 typů nebo na 15 typů rozpouštědel

Standardní proces se vzorky

1. Násátí vzorku do jehly a nadávkování do SPE kolonky
2. Možnost opakování procesu až do celkového objemu vzorku 100 ml
3. Odvod nepotřebné kapaliny do odpadu
4. Vialka, která obsahovala vzorek může být na závěr promyta rozpouštědlem

HPST: LCTEch Freestyle SPE - Standardní proces se vzorky

Proces s SPE kolonkou dávkování malých objemů

1. SPE kolonka je přemístěna do portu, kde je odváděna odpadní kapalina
2. Na SPE kolonku je nadávkováno cca 250 µl vzorku pomocí pipetovací jehly
3. Vzorek je protlačen sorpčním ložem tlakovou extrakcí

HPST: LCTEch Freestyle SPE - Proces s SPE kolonkou - dávkování malých objemů

Obousměrné SPE (bidirect)

1. Vzorek je nasáván do SPE kolonky zespodu
2. Po průchodu vzorku ve směru nahoru je zpět opět zatlačen shora dolů

• vhodné pro forenzní a dopingové aplikace
• důsledná interakce vzorku se sorbentem
• vzorek se nijak nedotkne součástí instrumentu, jde pouze o styk vzorku s vialkou a SPE kolonkou

HPST: LCTEch Freestyle SPE - Obousměrné SPE (bidirect)

Aplikace Freestyle SPE

• Vhodné pro lepivé vzorky např. mozková tkáň
• Kapalný vzorek je možné po aplikaci na sorbent zachytit do vialky pro další možné analýzy

Aplikace č. AN0022

• Amphetamine

• Ibuprofen

• Benzoylecgonine

• Methadone

• Cocaine

• Metoprolol

• Codeine

• Morphine

• Diazepam

• Phenobarbitone

• Doxepin

• 0,5 g homogenizovaného vzorku + fosfátový pufr + standard

• SPE kolonka Evolute CX 50 kondicionace fosfátovým pufrem

• Aplikace 5 ml vzorku

• Promytí vodou

• Eluce: ethyl acetát/isopropanol nebo ethyl acetát / isopropanol /trimethylamin

• Analýza GC/MS

HPST: Stanovení drog a návykových látek v lidském mozku pomocí obousměrné SPE extrakce

Aplikace č. AN0023

• 98 typů léčiv a návykových látek

• 0,5 ml lidské krve + 2,5 ml vody

• SPE HLB - promytí vodou

• Aplikace 5 ml vzorku

• Promytí kolonky vodou

• Eluce metanolem

• Analýza LC-MS/MS

Možnost zapojení dvou SPE kolonek do série

• Píst s malým mrtvým objemem

HPST: LCTEch Freestyle SPE - Možnost zapojení dvou SPE kolonek do série

Možnost přímého dávkování eluátu do modulu EVA pro zakoncentrování

HPST: LCTEch Freestyle SPE - Možnost přímého dávkování eluátu do modulu EVA pro zakoncentrování

Volitelné příslušenství Freestyle SPE

• Připojení dusíku pro sušení SPE kolonek před jejich elucí

• Možnost připojení čtečky čárových kódů

• Senzor pro kontrolu výšky hladiny v nádobě s kapalným odpadem

• 💡💡💡 Aplikace

• 💡💡💡 Webináře

• 💡💡💡 Videa