Jaké parametry bych měl(a) zvážit při výběru GC kolony pro svou aplikaci?
- Foto: Phenomenex: Jaké parametry bych měl(a) zvážit při výběru GC kolony pro svou aplikaci?
- Video: Phenomenex: Meet Zebron: Quality GC Columns By Design
1) Polarita
Některé údaje o polaritě obvykle uvádí výrobce GC kolony, přičemž hodnota se obvykle stanoví pomocí Kovatsových retenčních indexů a McReynoldsových čísel. Obecně se doporučuje, aby polarita stacionární fáze co nejvíce odpovídala polaritě analyzovaných látek, takže pro analýzu uhlovodíků je vhodná nepolární fáze, jako je ZB-1 (hodnocená jako 5 na stupnici polarity), zatímco pro alkoholy se často volí ZB-Wax (57 na stupnici polarity).
2) Selektivita
Selektivita je určena různými funkčními skupinami přítomnými v polymerní stacionární fázi, jejíž základ tvoří polysiloxan nebo polyethylenglykol. Polysiloxanové fáze mají obvykle k polysiloxanovým řetězcům připojené methylové, fenylové nebo kyanopropylové skupiny, které umožňují různé interakce:
- Methylové skupiny: van der Waalsovy síly nebo Londonovy síly,
- Fenylové skupiny: π-π interakce,
- Kyanové skupiny: π-π a dipól-dipól interakce.
Zvýšení procenta fenylových nebo kyanopropylových skupin ve stacionární fázi zvyšuje polaritu. Fáze polyethylenglykolu (PEG) nabízejí místa pro dipól-dipólové a vodíkové vazby. Fáze PEG patří obvykle k nejpolárnějším dostupným fázím.
3) Délka
Se zvyšující se délkou kolony se zvyšuje počet teoretických pater, což napomáhá rozlišení, avšak se zvyšující se délkou kolony se také prodlužuje doba jakékoli prováděné analýzy. Kolona o délce 30 m je obecně dobrým výchozím bodem pro vývoj obecné metody, zatímco kolony o délce 60 m se obvykle používají pro analýzu komplexních směsí. Kolony o délce 15 m se obecně používají, když je vyžadováno rychlé oddělení méně komplexních směsí.
4) ID
Volba ID kolony má vliv jak na kapacitu kolony (kolik analyzované látky můžete nastříknout), tak na účinnost. Čím užší je vnitřní průměr kolony, tím vyšší je účinnost, ale nižší je její kapacita. Dobrým výchozím bodem pro vývoj metody je kolona s vnitřním průměrem 0,25 mm, která představuje dobrý kompromis mezi účinností a kapacitou. Pokud převádíte metodu ze staršího typu GC kolony s náplní na kapilární GC kolony, často se volí kolony s vnitřním průměrem 0,53 mm kvůli jejich vyšší kapacitě.
5) Tloušťka filmu
Tenké filmy poskytují nejvyšší účinnost, ale mají nižší retenci analyzované látky. Silnější filmy mají vyšší kapacitu, ale při vysokých teplotách dochází k většímu krvácení. Pokud se rozhodnete použít tenký film (0,1–0,25 µm) s aktivními analyzovanými látkami, je lepší zvolit kolonu, která je vysoce deaktivovaná, aby se zabránilo rozšiřování píků. Takové kolony obecně poskytují také menší prosakování.
