Vysušení SPE na bázi silikagelu může vést k nízké výtěžnosti vzorku
Phenomenex: Vysušení SPE na bázi silikagelu může vést k nízké výtěžnosti vzorku
U většiny aplikací SPE na reverzní fázi využívajících média na bázi oxidu křemičitého (např. Strata™ C18-E) se cartridge (nebo jamky v případě 96jamkových destiček) nejprve kondicionují pomocí organického rozpouštědla, jako je methanol, a poté se propláchnou vodou nebo pufrem. Pokud se média SPE na bázi oxidu křemičitého během těchto kondicionačních kroků nechají po delší dobu vyschnout, mohou vykazovat sníženou retenci analytů, zejména pokud jde o polární sloučeniny. Proto je nezbytné, aby uživatelé SPE věnovali během tohoto klíčového kondicionačního kroku velkou pozornost metodice, aby dosáhli přesných a reprodukovatelných výsledků.
Níže uvedený obrázek ukazuje dvě cartridge Strata C18-T (1 g/6 mL), které byly naplněny 4 mL modrého barviva (CuCl₂). Kartuše vlevo (A) byla nejprve kondicionována 12 mL methanolu, poté byla sušena po dobu deseti minut ve vysokém vakuu (10” Hg) a následně propláchnuta 12 mL vody. Jak je vidět na obrázku, modré barvivo je rovnoměrně rozloženo v celém sorbentním loži. Naproti tomu cartridge na pravé straně (B) byla kondicionována methanolem a bez jakéhokoli sušení okamžitě následovala voda. Za těchto podmínek je modré barvivo viditelné jako úzký, soustředěný pruh na začátku sorbentního lože. Po eluci byla výtěžnost z kartuše B výrazně vyšší než z kartuše A (vysušené kartuše). Tento rozdíl ve výtěžnosti lze připsat především zhoršené retenci barviva v důsledku vysušení sorbentního lože.
Tipy, jak zabránit náhodnému vysušení a ztrátě analytu
- Nenechte sorbentní lože vyschnout v žádném kroku (pokud to není výslovně uvedeno v metodě).
- Jako alternativu k vakuu použijte gravitační průtok, abyste zabránili přesušení.
- Centrifugujte při nízkých rychlostech (např. 500 ot./min) nebo použijte přetlak.
- Zvažte přechod na ekvivalentní polymerní sorbent, jako je Strata-X, který nevykazuje změny v retenci a výtěžnosti v důsledku periodického vysychání.
Phenomenex: Vysušení SPE kartuší na bázi siliky může vést k nízké výtěžnosti vzorku: A. Sorbent C18 na bázi siliky vysušený po kondicionaci methanolem; B. Sorbent C18 na bázi siliky kondicionovaný bez vysušení.
