Jak chránit GC kolonu – část 2

Vítejte zpět u tématu ochrany GC kolony! Pokud jste zmeškali první část nebo si chcete své znalosti osvěžit, další tipy k ochraně GC kolony najdete zde.

Ochrana GC kolony a jednotlivých komponent přístroje před znečištěnými vzorky nebo kontaminanty je zásadní. Netěkavé nebo vysokomolekulární složky mohou kontaminovat stacionární fázi, což vede ke zhoršení rozlišení píků, nižší přesnosti analýzy a zkrácení životnosti kolony. Odříznutí poškozené části kapilární kolony často dočasně obnoví její účinnost, postupem času však dochází k degradaci, která znemožní další použití kolony. Pokud pozorujete rychlý pokles účinnosti separace, existuje několik jednoduchých způsobů, jak kolonu lépe chránit a prodloužit její životnost.

Používejte liner se skelnou vatou

Liner je první obrannou linií kolony a jeho volba má zásadní vliv na množství kontaminantů, které se mohou dostat do kolony. Nejjednodušším řešením je použití lineru s malým množstvím silanizované skelné vaty, která zachycuje netěkavé složky a zabraňuje jejich přímému vstupu do kolony.

Upozornění: Skelná vata může zvyšovat aktivitu vůči kyselinám, zásadám a pesticidům. Drcení skelné vaty může odhalit nedeaktivované sklo a volné silanolové skupiny (–OH), a to i v případě, že byla vata původně deaktivována. To vede ke zvýšené aktivitě a horší reprodukovatelnosti, proto se důrazně doporučuje používat předplněné linery, nikoli linery plněné svépomocí.

Kromě volby lineru se skelnou vatou dbejte také na to, aby byl liner (stejně jako ostatní spotřební materiál) bez nahromaděných nečistot, které se mohou v průběhu času vytvářet. Zbytky ze sept, jádra sept a další částice se mohou zachytit ve skelné vatě a často nejsou na první pohled patrné. Pravidelná výměna lineru (a dalšího spotřebního materiálu dle potřeby) pomáhá omezit potřebu řešení problémů a zjednodušuje údržbu systému.

Vypalujte kolonu (bake-out)

Nejjednodušším způsobem, jak snížit kontaminaci kolony, je zařadit krátký vysokoteplotní „bake-out“ (vypalování) na konec standardní GC metody. Tento krok pomáhá odstranit vysokovroucí kontaminanty, které by jinak v koloně zůstávaly a způsobovaly její poškození.

Při vypalování musí být konečná teplota pece nastavena dostatečně vysoko, aby došlo k eluování těchto složek, ale zároveň nesmí být překročena teplota, při které by došlo k tepelnému poškození kolony. Vypalování lze provádět buď izotermicky, nebo – častěji – postupným zvyšováním teploty pece až do eluce posledních složek z kolony.

Upozornění: Nikdy nepřekračujte maximální povolenou provozní teplotu kolony. Při izotermickém provozu nepřekračujte horní teplotní limit kolony po dobu delší než 15 minut.