<h3><strong>Abstrakt</strong></h3><p><strong>Byla vyvinuta kvantitativní metoda pro stanovení sedmi nitrosaminů, včetně N-nitrosodimethylaminu (NDMA), založená na analytickém postupu podle metody US EPA 521. Regulační orgány stanovují limity nebo doporučené hodnoty pro obsah NDMA v pitné vodě, což zvyšuje potřebu citlivých a robustních analytických metod. Tato studie ukazuje, že přístroj </strong><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://gcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=5977"><strong>Agilent 5977 GC/MSD</strong></a><strong> pracující v režimu pozitivní chemické ionizace (PCI) s amoniakem dosahuje přístrojových detekčních limitů v řádu jednotek ppt pro všech sedm sledovaných sloučenin (0,0063 až 0,0655 ppb). Metoda rovněž vykazuje dobrou opakovatelnost – relativní směrodatná odchylka plochy píku byla &lt; 4,8 % při šesti měřeních standardu o koncentraci 0,1 ppb pro NDMA, NMEA, NDEA, NDPA, NPIR a NDBA a standardu o koncentraci 0,5 ppb pro NPYR.</strong></p><h3><strong>Úvod</strong></h3><p>Nitrosaminy představují dobře známou skupinu karcinogenních sloučenin, které jsou již několik desetiletí předmětem intenzivního vědeckého výzkumu i regulačního posuzování.¹ V posledních letech zavedly různé regulační autority doporučené hodnoty pro obsah N-nitrosodimethylaminu (NDMA) v pitné vodě. NDMA vzniká jako<strong> </strong>vedlejší produkt při dezinfekci pitné vody během procesů její úpravy.</p><p>V roce 2004 zveřejnila <strong>Americká agentura pro ochranu životního prostředí</strong> (US EPA) metodu <strong>EPA 521</strong>, analytickou metodu založenou na GC/MS pro stanovení sedmi nitrosaminů, včetně NDMA, v pitné vodě, která slouží jako podpora monitorovacích a regulačních programů.²</p><p>V roce 2010 navrhla organizace Health Canada maximální přípustnou koncentraci NDMA v pitné vodě ve výši 40 ng/l³. V Evropské unii zavedlo několik členských států vlastní národní limity pro obsah nitrosaminů v pitné vodě. Například v Německu je koncentrace NDMA 10 ng/l považována za mezní hodnotu, při jejímž překročení musí být zahájena nápravná opatření ke snížení jeho koncentrace.⁴</p><p>Tato aplikační poznámka demonstruje schopnost systému <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://gcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=5977"><strong>Agilent 5977 Series GC/MSD</strong></a><strong> </strong>zajistit reprodukovatelné stanovení sedmi nitrosaminů zahrnutých v metodě EPA 521 s lineární odezvou při použití pozitivní chemické ionizace (PCI) s amoniakem.</p><ul><li><strong>Chemická ionizace</strong> (CI) je metoda měkké ionizace používaná v hmotnostní spektrometrii, která prostřednictvím řízených reakcí mezi ionty a molekulami zvyšuje intenzitu molekulárních iontů. Při CI je nejprve ionizován reagenční plyn a vzniklé reagenční ionty následně přenášejí náboj na molekuly analytu. Výsledkem je podstatně nižší míra fragmentace než při klasické elektronové ionizaci (EI).<br>&nbsp;</li><li><strong>Pozitivní chemická ionizace</strong> (PCI) dále zvyšuje citlivost tím, že generuje převážně protonované molekulární ionty [M + H]⁺. Tím koncentruje iontový signál do jednoho vysoce zastoupeného iontu, poskytuje vyšší odezvu a zlepšuje poměr signálu k šumu při analýze stopových koncentrací. Amoniak je pro PCI obzvláště účinným reagenčním plynem díky účinnému přenosu protonů, nízkému spektrálnímu pozadí a schopnosti vytvářet stabilní molekulární ionty s vysokou intenzitou.</li></ul><p>Díky těmto vlastnostem představuje PCI s amoniakem velmi vhodný ionizační režim pro citlivou a selektivní analýzu malých polárních kontaminantů, jako jsou nitrosaminy, u nichž je zásadní detekce velmi nízkých koncentrací i spolehlivá identifikace molekulárních iontů.</p><h5><strong>Tabulka 1. Sedm nitrosaminů zahrnutých do metody EPA 521</strong></h5><p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_10819629db.jpg" alt="Altium International: Citlivé a reprodukovatelné stanovení nitrosaminů metodou GC/MSD" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_10819629db.jpg 245w," sizes="100vw" width="901" height="487"></p><h3><strong>Experimentální část</strong></h3><h4><strong>Reagencie a standardy</strong></h4><ul><li>Standardy nitrosaminů a dichlormethan byly zakoupeny od společnosti Sigma-Aldrich.</li><li>Kalibrační pracovní roztoky byly připraveny v dichlormethanu.</li></ul><h4><strong>Parametry přístroje</strong></h4><p>Provozní podmínky a parametry analýzy přístroje Agilent 5977 GC/MSD jsou uvedeny v <strong>tabulkách 2</strong> a <strong>3</strong>.</p><h5><strong>Tabulka 2. Provozní parametry přístroje Agilent 5977 GC/MSD pro analýzu nitrosaminů</strong></h5><p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_4_8328bf9670.jpg" alt="Altium International: Citlivé a reprodukovatelné stanovení nitrosaminů metodou GC/MSD" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_4_8328bf9670.jpg 142w," sizes="100vw" width="959" height="1055"></p><h5><strong>Tabulka 3. Parametry režimu SIM přístroje Agilent 5977 GC/MSD pro analýzu nitrosaminů</strong></h5><p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_2_651a21777a.jpg" alt="Altium International: Citlivé a reprodukovatelné stanovení nitrosaminů metodou GC/MSD" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_2_651a21777a.jpg 245w," sizes="100vw" width="1195" height="649"></p><h3><strong>Výsledky a diskuse</strong></h3><h4><strong>Kalibrační křivky</strong></h4><p>Pro sedm nitrosaminů byly vyhodnoceny desetibodové kalibrační křivky v koncentračním rozmezí 0,1 až 20 ppb (0,1; 0,2; 0,25; 0,5; 1; 2; 5; 8; 10 a 20 ppb). Výsledky jsou uvedeny v <strong>tabulce 4</strong> a na <strong>obrázku 1</strong>. U NDMA, NMEA, NDEA, NDPA, NPIR a NDBA byla dosažena vynikající linearita s <strong>koeficientem determinace</strong> (R²) <strong>0,9989</strong> nebo vyšším v celém kalibračním rozsahu 0,1 až 20 ppb. Dobrou linearitu vykazoval také NPYR s hodnotou <strong>R² 0,9987 </strong>v koncentračním rozmezí 0,5 až 20 ppb.</p><h5><strong>Tabulka 4. Výsledky kalibrace nitrosaminů</strong></h5><p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_3_c25d58205a.jpg" alt="Altium International: Citlivé a reprodukovatelné stanovení nitrosaminů metodou GC/MSD" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_3_c25d58205a.jpg 221w," sizes="100vw" width="688" height="487"></p><h5><strong>Obrázek 1. Kalibrační křivky standardů nitrosaminů v dichlormethanu</strong></h5><p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_5_90a3aad4c7.jpg" alt="Altium International: Citlivé a reprodukovatelné stanovení nitrosaminů metodou GC/MSD" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_5_90a3aad4c7.jpg 150w," sizes="100vw" width="1146" height="1192"></p><h4><strong>Opakovatelnost</strong></h4><p>Opakovatelnost byla hodnocena na nejnižší kalibrační úrovni 0,1 ppb pro NDMA, NMEA, NDEA, NDPA, NPIR a NDBA a při koncentraci 0,5 ppb pro NPYR. Pro každý analyt bylo provedeno šest opakovaných nástřiků. Výsledky jsou shrnuty v <strong>tabulce 5</strong> a na <strong>obrázcích 2A </strong>a <strong>2B</strong>. Byla prokázána vynikající opakovatelnost – hodnoty<strong> RSD plochy píku &lt; 4,8 % </strong>a hodnoty <strong>RSD vypočtené koncentrace &lt; 3,7 %</strong>, což potvrzuje vysokou stabilitu odezvy přístroje a spolehlivou kvantifikaci i na nejnižších kalibračních úrovních.</p><h5><strong>Tabulka 5. Hodnoty %RSD pro standardy nitrosaminů při nejnižší kalibrační koncentraci</strong></h5><p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_6_11cc1fb35a.jpg" alt="Altium International: Citlivé a reprodukovatelné stanovení nitrosaminů metodou GC/MSD" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_6_11cc1fb35a.jpg 245w," sizes="100vw" width="1579" height="722"></p><h5><strong>Obrázek 2A. Překryté chromatogramy NDMA, NMEA, NDEA, NDPA, NPIR a NDBA při koncentraci 0,1 ppb</strong></h5><p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_7_624ffd1416.jpg" alt="Altium International: Citlivé a reprodukovatelné stanovení nitrosaminů metodou GC/MSD" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_7_624ffd1416.jpg 179w," sizes="100vw" width="1377" height="1196"></p><h5><strong>Obrázek 2B. Překryté chromatogramy NPYR při koncentraci 0,5 ppb</strong></h5><p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_8_dbee0940a9.jpg" alt="Altium International: Citlivé a reprodukovatelné stanovení nitrosaminů metodou GC/MSD" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_8_dbee0940a9.jpg 233w," sizes="100vw" width="1185" height="794"></p><h4><strong>Detekční limity přístroje (IDL)</strong></h4><p>Detekční limity přístroje (Instrument detection limit, IDL) byly vypočteny s 99% statistickou spolehlivostí, že naměřený signál analyzované látky představuje skutečnou koncentraci větší než nula. V této studii byly IDL stanoveny na základě analýzy šesti opakovaných nástřiků standardu s nejnižší kalibrační úrovní.</p><h5><strong>IDL byly vypočteny podle následujícího vztahu:</strong></h5><p><strong>IDL = (t<sub>α, n–1</sub>) × (%RSD) × (koncentrace standardu)/100</strong></p><p><strong>kde:</strong></p><ul><li><strong>t<sub>α, n–1</sub></strong> je Studentova hodnota <i>t</i> odpovídající zvolené úrovni spolehlivosti a počtu stupňů volnosti (n = 6, tedy n – 1 = 5),</li><li><strong>%RSD</strong> je relativní směrodatná odchylka šesti opakovaných nástřiků,</li><li><strong>koncentrace standardu</strong> je koncentrace nejnižšího kalibračního standardu použitého pro stanovení IDL.</li></ul><p>Při 99% úrovni spolehlivosti a pěti stupních volnosti odpovídá hodnota <strong>t<sub>α,5</sub></strong> hodnotě <strong>3,365</strong>.</p><p>Na základě tohoto výpočtu byly stanoveny IDL v rozmezí <strong>0,0063 až 0,0655 ppb</strong>, jak uvádí <strong>tabulka 6</strong>.</p><h5><strong>Tabulka 6. Detekční limity přístroje (IDL) systému Agilent 5977 GC/MSD pro nitrosaminy</strong></h5><p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_9_8396f264b8.jpg" alt="Altium International: Citlivé a reprodukovatelné stanovení nitrosaminů metodou GC/MSD" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Agilent_Technologies_Sensitive_and_Reproducible_Determination_of_Nitrosamines_by_GC_MSD_9_8396f264b8.jpg 245w," sizes="100vw" width="1345" height="667"></p><h3><strong>Závěr</strong></h3><p>Studie prokázala, že systém<strong> Agilent 5977 GC/MSD</strong> pracující v režimu<strong> PCI s amoniakem </strong>poskytuje citlivost, přesnost a reprodukovatelnost potřebné pro stanovení nitrosaminů ve stopových koncentracích.</p><p>Metoda vykázala vynikající linearitu s <strong>R² 0,9989</strong> nebo vyššími v koncentračním rozmezí 0,1 až 20,0 ppb pro šest nitrosaminů a s hodnotou <strong>R² 0,9987 </strong>v rozmezí 0,5 až 20,0 ppb pro NPYR. Analytická opakovatelnost byla velmi dobrá, s hodnotami <strong>%RSD &lt; 4,8 %</strong> na nejnižší kalibrační úrovni, což svědčí o stabilní a konzistentní odezvě přístroje. <strong>IDL </strong>se pohybovaly v rozmezí <strong>0,0063 až 0,0655 ppb</strong>, což dokazuje schopnost systému spolehlivě odlišit signál analytu od šumu přístroje.</p><p>Celkově tyto výsledky potvrzují vhodnost systému Agilent 5977 GC/MSD jako citlivé a spolehlivé platformy pro analýzu nitrosaminů v aplikacích vyžadujících detekci stopových koncentrací.</p>

Citlivé a reprodukovatelné stanovení nitrosaminů metodou GC/MSD

Chemická zbraň v žihadle

<p><strong>V týdnu od 27. července na Vás čekají v oblasti plynné/pevné fáze a především GC, GC/MS, Raman a FTIR následující webináře.</strong></p><blockquote><h4><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.gcms.cz/webinars"><strong>👉 DETAILY A REGISTRACE V SEKCI WEBINÁŘE</strong></a></h4></blockquote><blockquote><p><strong>👉 Vyhledávejte a filtrujte v největší globální databázi</strong> s více než <strong>5 500 GC, HPLC, MS a spektroskopickými webináři</strong>.</p></blockquote><h5><strong>1. </strong><span><strong>Thermo Fisher Scientific</strong></span><strong>: Powerful Isotopic Insights, Elevated</strong></h5><ul><li>Út, 28.7.2026 10:00 CEST</li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://gcms.cz/webinar/6366">Registrace</a></li></ul><p>Buďte mezi prvními, kdo se seznámí s novou generací přístrojů Thermo Scientific Orbitrap IRMS. Webinář představí nejnovější možnosti přesné analýzy izotopových poměrů a jejich využití ve výzkumu i rutinních aplikacích.</p><h5><strong>2. </strong><span><strong>Agilent Technologies</strong></span><strong>: PFAS &amp; Our Planet: Textiles and Materials</strong></h5><ul><li>Út, 28.7.2026 11:00 CEST</li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://gcms.cz/webinar/6142">Registrace</a></li></ul><p>Zjistěte, jak nové požadavky na regulaci PFAS ovlivňují testování textilií a dalších materiálů. Webinář se zaměří na pracovní postupy LC-MS/MS a GC/MS/MS, přípravu vzorků, kontrolu kontaminace i zajištění souladu s legislativou.</p><h5><strong>3. </strong><span><strong>Agilent Technologies</strong></span><strong>: Fast, Non-Destructive Pharmaceutical Analysis with the Agilent TRS100</strong></h5><ul><li>St, 29.7.2026 07:30 CEST</li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://gcms.cz/webinar/6390">Registrace</a></li></ul><p>Objevte možnosti nedestruktivní analýzy celých tablet pomocí systému Agilent TRS100. Webinář ukáže, jak zrychlit farmaceutickou kontrolu kvality odstraněním potřeby přípravy vzorků při zachování spolehlivých výsledků.</p><h5><strong>4. </strong><span><strong>Thermo Fisher Scientific</strong></span><strong>: Drive Lab Collaboration and Efficiency with a Networked Chromatography and Mass Spectrometry Data System</strong></h5><ul><li>St, 29.7.2026 19:00 CEST</li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://gcms.cz/webinar/6405">Registrace</a></li></ul><p>Zjistěte, jak síťově nasazený systém Thermo Scientific Chromeleon CDS pomáhá centralizovat laboratorní data, zjednodušit správu chromatografických a hmotnostně spektrometrických systémů, podpořit spolupráci mezi uživateli a usnadnit dodržování regulatorních požadavků.</p>

Webináře LabRulezGCMS týden 31/2026

Webináře

Aplikace

Životní prostředí

Vody

Zdraví

Věda a výzkum

Článek

Akademie věd České republiky (AV ČR) vznikla v roce 1992 jako nástupce někdejší Československé akademie věd. V současnosti ji tvoří komplex 54 veřejných výzkumných institucí.

Akademie věd České republiky

Je autorizovaným distributorem společnosti Agilent Technologies pro Českou republiku v oblastech chromatografie (GC, HPLC, UHPLC, kapilární elektroforéza) a hmotnostní spektrometrie (GC/MS, LC/MS, CE/MS), disolučních aparátů, molekulární (UV-Vis, UV-Vis-NIR, fluorescence, FTIR analyzátory a mikroskopy) a atomové spektroskopie (ICP-OES, ICP-MS, AAS), a v neposlední řadě také v oblasti molekulární biologie a genomiky (analýza nukleových kyselin a proteinů, microarray skenery a skla, PCR & RT-PCR, qPCR, řešení pro NGS, reagencie pro mutagenezi a klonování, sondy FISH a další).

Altium International

Vše ze světa analytické chemie na jednom místě. Propojujeme lidi při řešení jejich problémů. U nás naleznete všechny potřebné informace snadno, rychle a přehledně. Přestaňte hledat a začněte nacházet.

Mohlo by Vás zajímat

Webináře LabRulezGCMS týden 31/2026

Citlivé a reprodukovatelné stanovení nitrosaminů metodou GC/MSD

Chemická zbraň v žihadle