Quantitation of Cannabinoids in Hemp Flower by Derivatization GC/MS

Význam tématu

Cannabis sativa L. je rozšířená pro farmaceutické i průmyslové využití. Rozlišení mezi hempe a cannabis podle obsahu THC je klíčové z hlediska legislativy. Pro přesné stanovení celkové potency je třeba analyzovat i nativní kyselé formy kanabinoidů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout a validovat postup pro kvantifikaci celkového THC a dalších devíti kanabinoidů v květech hempe s využitím offline derivatizace a GC/MS. Studie zahrnovala optimalizaci derivatizace, přípravu kalibrací a aplikaci metody na reálný vzorek.

Použitá metodika

• Extrahování homogenizovaného hempe etylacetátem
• Filtrace a postupné ředění extraktu až na celkový ředící faktor 2000
• Offline derivatizace s pomocí BSTFA a 1 % trimethylsilylchloridu
• Inkubační podmínky 70 °C po dobu 60 minut

Použitá instrumentace

• Agilent 8890 GC s multimode inlet
• Agilent 5977B MSD s inertním iontovým zdrojem
• Kolona DB-35MS UI 30 m × 0.25 mm × 0.25 µm
• Software MassHunter Workstation pro akvizici a kvalifikaci dat

Hlavní výsledky a diskuse

• Lineární rozsah 0.05 až 1 ppm pro neutrální kanabinoidy s r2 nad 0.99
• CBDA kalibrováno v rozsahu 0.25 až 10 ppm
• Opakovatelnost %RSD pod 15 % pro všechny analyty
• Recovery kyselých kanabinoidů až 700 % při nižších kalibracích
• Reálný vzorek vykázal CBDA 1777 ppm (0.8 % suché váhy) a THC pod LOQ

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje zachytit termolabilní kyseliny v nativní formě, zjednodušuje kvantifikaci celkového THC součtem kyselé a neutrální formy a je flexibilní pro doplňkové kanabinoidy.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření na stanovení dalších minoritních kanabinoidů a terpenů
• Integrace s vysokorychlostními GC systémy pro rychlejší analýzy
• Adaptace na online derivatizaci pro snížení manipulačních kroků
• Implementace v rutinní kontrole jakosti a legislativní praxi

Závěr

Představená metodika derivatizace GC/MS přináší spolehlivé a reprodukovatelné stanovení celkové potency hempe. Optimalizace podmínek zajistila úplnou derivatizaci a robustní kvantifikaci kyselých i neutrálních kanabinoidů.

Reference

1. Russo EB et al J Exp Bot 2008 59 4171-4182
2. Skoglund G et al Sci Rep 2013 3 2686
3. H R2 Agriculture Improvement Act 2018 Section 10111
4. Macherone AA Comprehensive Analytical Chemistry Elsevier in press
5. Orata F IntechOpen London 2012