Phenomenex SAMPLE PREPARATION Selection and Users Guide

Význam tématu

V analytické chemii je příprava vzorku kritickým krokem před chromatografickou či hmotnostně-spektrální analýzou. Správná úprava odstraní nežádoucí matrikové komponenty, sníží potlačení iontů, prodlouží životnost chromatografických kolon a zajistí reprodukovatelné a citlivé měření.

Cíle a přehled článku

Tento průvodce představuje hlavní techniky přípravy vzorku: mechanickou filtraci, precipitaci proteinů, odstraňování fosfolipidů, QuEChERS pro potravinářské matice, zjednodušenou kapalnou extrakci (SLE) a pevnou fázi (SPE). Cílem je nabídnout přehledné srovnání, postupy a doporučení pro volbu metody podle typu vzorku a analytické úlohy.

Použitá metodika a instrumentace

Každá metoda využívá specifický sorbent nebo filtr:

• Filtrace: stříkačkové filtry (RC, PTFE, PES, NY, PVDF, GF) chrání kolonu a odstraňují částice.
• Proteinová precipitace: přídavek acetonitrilu nebo methanolu vyvolá agregaci proteinů, poté se směs odstředí nebo přefiltruje.
• Odstraňování fosfolipidů (Phree): sorbent selektivně zachytí fosfolipidy po precipitaci, zvyšuje citlivost LC–MS analýz.
• QuEChERS: extrakce acetonitrilem a solí (MgSO₄, NaCl, NaOAc, Na₃C₆H₅O₇) následovaná disperzní SPE (PSA, C18, GCB) pro potravinářské a environmentální vzorky.
• Simplified Liquid Extraction (Novum SLE): sorbentová extrakce bez emulzí, snadno automatizovatelná, selektivně odstraňuje proteiny a fosfolipidy.
• Solid Phase Extraction (Strata/Strata-X): polymerové a silikagelové sorbenty (reverzní fáze, ion-exchange, normal phase) umožňují koncentrovat, čistit a měnit rozpouštědla před GC či LC.

Hlavní výsledky a diskuse

Implementace uvedených postupů vede k výraznému poklesu interferencí a potlačení signálu, lepší opakovatelnosti a vyšší citlivosti měření. Příklad: odstranění fosfolipidů pomocí Phree zavedlo více než 80% snížení potlačení v LC–MS a QuEChERS umožnilo v potravinách detekci stovek reziduí v desítkách minut. Novum SLE eliminuje emulze a udržuje >90% výtěžnost modelových drog v moči. SPE s polymerovými sorbenty Strata-X nabízí vysokou kapacitu a pH stabilitu (1–14).

Přínosy a praktické využití metody

• Potravinářský průmysl: rychlé víceanalyčné testy na pesticidy a mykotoxiny.
• Farmacie a biotechnologie: čištění krevních a tkáňových vzorků, DMPK studie.
• Environmentální monitoring: extrakce kontaminantů z vody, půd a sedimentů.
• Klinická toxikologie: spolehlivá analýza drog v biologických matricích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Automatizace přípravy vzorků, miniaturizace formátů 384 a 1536, aplikace zelené chemie (nižší spotřeba rozpouštědel), integrace on-line SPE s UHPLC–MS/MS a využití nanomateriálů jako sorbentů. Vývoj adaptivních sorbentů pro selektivní extrakci stopových látek a aplikace strojového učení pro optimalizaci workflow jsou perspektivní.

Závěr

Všechny představené techniky sample-prepu jsou klíčové pro zajištění spolehlivých a citlivých analytických výsledků. Výběr metody závisí na typu vzorku, požadované čistotě a workflow laboratoře. Integrované a automatizované přístupy dále zefektivňují pracovní postupy a snižují riziko chyb.

Použitá instrumentace

• Stříkačkové filtry Phenex (RC, PTFE, PES, NY, PVDF, GF).
• Porovnávací modely pro LC–MS: Kinetex® C18, Biphenyl, Synergi™ Fusion-RP.
• Vacuum a tlakové SPE/SLE manometry a 96-well moduly (Phenomenex, UCT, Waters, Agilent, Biotage).
• Automatizované výsokotlaké systémy a odstředivky pro 96-well formáty.

Reference

Žádné explicitně citované literární zdroje ve zdrojovém dokumentu.