VITATOX: Sledování a regulace nitrosaminů (NAMs ) v léčivech reálná hrozba nebo emoce

Význam tématu

Sledování nitrosaminů (N-nitrosaminů, NAMs) je klíčové pro zajištění kvality a bezpečí léčiv. Tyto nečistoty vykazují genotoxické a karcinogenní účinky, a proto jejich kontrola chrání pacienty před nežádoucí expozicí a napomáhá udržet kontinuitu dodávek farmaceutických produktů.

Cíle a přehled studie

Prezentace se zaměřuje na:

• historii a mechanismus účinku nitrosaminů,
• hlavní zdroje jejich vzniku v potravinách a léčivech,
• regulační požadavky a výpočet limitů podle ICH M7(R1) a nařízení ES,
• analytické metody pro detekci genotoxických nečistot,
• strategie eliminace NAMs v léčivých formách.

Použitá metodika a instrumentace

Pro stanovení nitrosaminů je využita kapalinová chromatografie spřažená s trojitým kvadrupólovým hmotnostním spektrometrem (UHPLC-MS/MS). Významné je dosažení vysoké selektivity pomocí režimů SIM a MRM, redukce matricových efektů (SPE, naředění, interní standardy) a optimalizace chromatografických podmínek.

Použitá instrumentace

• UHPLC systém pro separaci analytů
• Trojitý kvadrupólový hmotnostní spektrometr
• SPE (pevná fáze) pro přípravu vzorků

Hlavní výsledky a diskuse

Analýza 1042 vzorků od různých výrobců prokázala nadlimitní obsah NAMs u přibližně 80 % lékových forem. Diskuse zahrnuje:

• rozdíl mezi teoretickým genotoxickým rizikem a klinickými daty (statisticky nevýznamný rozdíl incidence rakoviny u pacientů exponovaných NDMA ve valsartanu),
• přísné limity (18 ng/den u látek bez toxikologických dat) versus reálná dostupnost léčiv,
• nutnost rovnováhy mezi minimalizací rizika a zajištěním kontinuální léčby.

Přínosy a praktické využití metody

• Zajištění souladu s ICH M7(R1) a evropskými nařízeními,
• czasné odhalení rizika NAMs v procesu vývoje a výroby,
• optimalizace QA/QC postupů ve farmacii.

Budoucí trendy a možnosti využití

• nasazení vysokorozlišovací MS pro potlačení izobarických interferencí,
• pokročilé techniky přípravy vzorků (mikroextrakce, nové SPE materiály),
• vývoj a aplikace účinnějších scavengerů pro kontrolu nitrosace,
• integrování bioassay a in silico modelů pro komplexní hodnocení mutagenicity.

Závěr

Nitrosaminy představují významnou výzvu pro farmaceutický průmysl. Klíčové jsou citlivé a selektivní analytické metody, přísné regulační postupy a efektivní strategie eliminace, které umožňují udržet vysokou úroveň bezpečí pacientů a zároveň zajistit dostupnost léčiv.

Reference

• 1. Maurici D., Aardema M., Corvi R. et al. Genotoxicity and Mutagenicity. ATLA. 2005, 33(1):117-130.
• 2. Irigaray P., Newby J.A., Clapp R. et al. Lifestyle-Related Factors and Environmental Agents Causing Cancer: An Overview. Biomed. Pharmacother. 2007, 61(10):640-658.
• 3. Chienthavorn O., Subprasert P., Insuan W. Nitrosamines Extraction from Frankfurter Sausages by Using Superheated Water. Sep. Sci. Technol. 2014, 49(6):838-846.
• 4. Fan C.-C., Lin T.-F. N-Nitrosamines in Drinking Water and Beer: Detection and Risk Assessment. Chemosphere. 2018, 200:48-56.
• 5. Tricker A.R., Preussmann R. Carcinogenic N-nitrosamines in the diet: occurrence, formation, mechanisms and carcinogenic potential. Mutat. Res. 1991, 259(3):277-289.
• 6. van Maanen J.M., Pachen D.M., Dallinga J.W., Kleinjans J.C. Formation of nitrosamines during consumption of nitrate- and amine-rich foods, and the influence of the use of mouthwashes. Cancer Detect. Prev. 1998, 22(3):204-212.
• 7. ICH Guideline M7(R1): Assessment and Control of DNA Reactive (Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals To Limit Potential Carcinogenic Risk. FDA. 2018.
• 8. EMA Article 31 Referral: Sartans Assessment Report. EMA/CHMP. 2019.
• 9. Impact of Article 5(3) Scientific Opinion on Nitrosamines in Human Medicinal Products. EMA/H/A-31/1471. 2020.
• 10. EMA Q&A on CHMP Opinion for Article 5(3) Nitrosamines. EMA/409815/2020 Rev.14. 2022.
• 11. ScienceDirect Topic: N-Nitrosodimethylamine. 2023.
• 12. Study on cancer incidence in valsartan-treated patients with and without NDMA contamination. PMC9798794. 2022.
• 13. Ashworth I.W. et al. Potential for the Formation of N-Nitrosamines during the Manufacture of Active Pharmaceutical Ingredients: Assessment of the Risk Posed by Trace Nitrite in Water. Org. Process Res. Dev. 2020, 24(9):1629-1646.
• 14. Schlingemann J. et al. Avoiding N-nitrosodimethylamine formation in metformin pharmaceuticals by limiting dimethylamine and nitrite. Int. J. Pharm. 2022, 620:121740.
• 15. Homšak M. et al. Assessment of a Diverse Array of Nitrite Scavengers in Solution and Solid State: A Study of Inhibitory Effect on the Formation of Alkyl-Aryl and Dialkyl N-Nitrosamine Derivatives. Processes. 2022, 10(11):2428.