Comparison of 37 Component FAME Standard on Four Capillary GC Columns

Význam tématu

Analýza mastných kyselin v podobě metylesterů (FAME) je klíčová pro kvalitativní a kvantitativní stanovení tuku v potravinách, krmivech a biologických vzorcích. Správná identifikace nasycených, mononenasycených i polynenasycených kyselin v řadě potravinářských i environmentálních matri­cích umožňuje dodržení výživových norem, kontrolu transmastných kyselin a optimalizaci technologických procesů.

Cíle a přehled studie

Cílem prezentované studie bylo porovnat separační vlastnosti čtyř kapilárních GC kolon odlišné polarity při analýze 37 komponentního FAME standardu značky Supelco. Testované fáze: Omegawax 250 (polyethylenglykol), polyalkylenový glycol (PAG), SP-2380 (95 % cyanopropyl/5 % phenyl polysiloxan) a SP-2560 (100 % bis-cyanopropyl polysiloxan). Studie řešila eluce klíčových nasycených i nenasycených, včetně cis/trans izomerů a omega-3/omega-6 kyselin.

Použitá metodika a instrumentace

Pro všechny analýzy byly nastaveny shodné parametry injekce a detekce: detektor FID (20 pA) při 260 °C, injekce 1 μl roztoku 10 mg/ml, split 100:1, teplota injektoru 250 °C. Rozdíly se týkaly programovaného ohřevu trouby a lineární rychlosti nosného plynu:

• Omegawax 250: 30 m × 0,25 mm I.D. × 0,25 μm, 50 °C (2 min) až 220 °C (4 °C/min), hold 15 min, He při 30 cm/s.
• PAG: 30 m × 0,25 mm I.D. × 0,25 μm, 50 °C (2 min) až 220 °C (4 °C/min), hold 15 min, He při 30 cm/s.
• SP-2380: 30 m × 0,25 mm I.D. × 0,20 μm, 50 °C (2 min) až 250 °C (4 °C/min), hold 15 min, He při 20 cm/s.
• SP-2560: 100 m × 0,25 mm I.D. × 0,20 μm, 140 °C (5 min) až 240 °C (4 °C/min), hold 15 min, He při 20 cm/s.

Hlavní výsledky a diskuse

Kolony na polyethylenglykolové bázi (Omegawax 250, PAG) poskytly přísnou separaci dle počtu uhlíků a stupně nenasycení. Na méně polar­ním PAG fázovém systému došlo k minimálnímu překrývání delších poly­nenasycených esterů. Vyšší polarita cyanosilikonových fází (SP-2380, SP-2560) přinesla vynikající rozlišení cis/trans izomerů, ale částečné překryvy homologů s delšími řetězci (u trienoických a více nenasycených esterů). SP-2560 zvláště zajistila nejlepší oddělení geometrických izomerů (C18:1n9c/t, C18:2n6c/t).

Přínosy a praktické využití metody

Použití kombinace PEG a cyanosilikonové kolony spolu se standardem Supelco 37 Component FAME Mix umožňuje rychlou a spolehlivou identifikaci klíčových mastných kyselin v potravinářských produkt­tech, farmacii a environmentální analytice. Minimalizuje se rozsah použitých standardů a zkracuje laboratorní čas díky jedno­injekčnímu potvrzení řady izomerů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další zlepšení lze očekávat v oblasti dvourozměrné plynové chromatografie (GC×GC), kde kombinace vícefázových kol umožní ještě komplexnější profilaci mastných kyselin. Automatizace přípravy vzorků a vývoj citlivějších detektorů pak podpoří špičkové kvantitativní analýzy nízkokoncentrovaných poly­nenasycených kyselin.

Závěr

Pro potvrzovací analýzy FAME standardů se doporučuje párování PEG kolony (Omegawax 250 či PAG) s cyanosilikonovou kolonou (SP-2560), které společně pokryjí jak homogenní rozlišení podle řetězců, tak detailní separaci cis/trans izomerů. Standard Supelco 37 Component FAME Mix výrazně zefektivňuje identifikaci mastných kyselin v komplexních potravinářských a biologických vzorcích.