Analysis of Genotoxic impurities

Význam tématu

Genotoxické nečistoty v léčivech představují zdravotní riziko i při velmi nízkých koncentracích. Spolehlivá detekce a kvantifikace těchto látek je nezbytná pro dodržení regulačních norem ICH a zajištění bezpečnosti pacientů.

Cíle a přehled studie

Cílem aplikace bylo vyvinout a validovat metodu separace a stanovení šesti typických genotoxických alkylhalogenidů (2-chlorpropan, bromoethan, 1-chlorpropan, 2-brompropan, butylchlorid, 1-brombutan) při úrovni 1 μg/mL v DMSO. Studie demonstruje schopnost GC-MS identifikovat a kvantifikovat tyto nečistoty s vysokou citlivostí a přesností.

Použitá metodika a instrumentace

Pro analýzu byla použita plynová chromatografie spojená s hmotnostní spektrometrií (GC-MS) následující konfigurace:

• Kolona SH-I-624Sil MS, délka 20 m, průměr 0,18 mm, tloušťka fáze 1 μm
• Program teploty: 40 °C (3 min), nárůst 20 °C/min do 200 °C, držení 10 min
• Injekce 1,0 μL v režimu splitless (zpětný tok 0,5 min), teplota injektoru 220 °C, liner s vlněnou výplní
• Přenosová fáze: helium konstantním tokem (40 cm/s), přepouštěcí tok 3 mL/min
• MS detektor: EI ionizace, zdroj na 280 °C, rozsah m/z 30–300, rychlost skenování 5 skanů/s, detekce iontů m/z 42, 43, 57, 108

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila v jedné kromatografické analýze separovat všechny sledované sloučeniny s dostatečným rozlišením. Masové spektra jednotlivých alkylhalogenidů vykazovala charakteristické fragmenty, což podporuje jejich jednoznačnou identifikaci. Citlivost metody dosahovala úrovně odpovídající 1 μg/mL, se stabilními resp. reprodukovatelnými plochami píků.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda je vhodná pro rutinní kontrolu kvality farmaceutických surovin a konečných přípravků. Umožňuje:

• Spolehlivou detekci genotoxických nečistot v nízkých koncentracích
• Rychlou chromatografickou analýzu s minimální časovou náročností
• Univerzální použití pro různé alkylhalogenidy

Budoucí trendy a možnosti využití

S dalším rozvojem rychlé GC a tandemové hmotnostní spektrometrie (GC-MS/MS) lze očekávat zvýšení senzitivity a selektivity. Automatizace přípravy vzorků a použití pokročilých dekonvolučních algoritmů podpoří vyšší propustnost analýz. Potenciál nabízí i integrace s ultrarychlými kolonnami a aplikace hyphenovaných technik (SPME-GC-MS).

Závěr

Vyvinutá GC-MS metoda na kolonně SH-I-624Sil MS pro stanovení šesti genotoxických alkylhalogenidů prokázala vysokou citlivost, spolehlivost a reproducibilitu. Hodí se pro farmaceutickou QA/QC praxi a splňuje požadavky na detekci nečistot podle platných předpisů.

Reference

1. Shimadzu Application Note ERAS-1000-0491, First Edition Sep. 2023, Shimadzu Corporation