Critical Factors in Selecting an Internal Standard for Accurate Determination of Blood Alcohols in Post Mortem Samples

Význam tématu

Stanovení obsahu alkoholu v krvi je nezbytné pro forenzní vyšetřování i dopravní kontrolu. Přesnost analýzy post mortem vzorků je kritická, neboť tradiční interní standard n-propanol může vznikat při rozkladných procesech, což zkresluje výsledky.

Cíle a přehled studie

Cílem je nalézt alternativu k n-propanolu, která zajistí spolehlivou kvantifikaci alkoholu v krvi u pozůstalých vzorků při zachování krátkého času analýzy a vysoké reprodukovatelnosti.

Použitá metodika a instrumentace

Analýza proběhla headspace GC-FID na Agilent 6890 s Overbrook HT-200 autosamplerem v konfiguraci duálních kapilárních kolon připojených přes Y-splitter ke dvěma FID detektorům. Testovány byly trojice kolón Restek Rtx-BAC1/2, J&W DB-ALC1/2 a Zebron ZB-BAC1/2. Parametry zahrnovaly izotermní program při 40 °C, konstantní tok helia 80 cm/s, split injekci 0,8:1 až 5:1 a hloubky filmu 2 – 3 µm.

Hlavní výsledky a diskuse

Restek i J&W kolony nedokázaly oddělit t-butanol od acetonu, což znemožnilo jeho použití jako interního standardu. Oba páry oddělily 2-butanol, ale zdvojnásobily dobu analýzy. Kolony Zebron ZB-BAC1/2 plně rozlišily t-butanol i 2-butanol od cílových analytů za méně než 2 minuty, čímž zkrátily celkový čas metody o cca 9 %. Linearity kalibračních křivek byla výborná (R2 0,998–0,9998), LOD a LOQ pod 0,0003 % a 0,001 %, a replikátní RSD do 3 %.

Přínosy a praktické využití metody

Nový pár Zebron kolón umožňuje spolehlivé stanovení alkoholu v post mortem i rutinních vzorcích bez interference vznikající při rozkladu, s rychlým průběhem a vysokou přesností. Laboratoře získají volbu t-butanolu nebo 2-butanolu jako interního standardu při zachování efektivity.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat rozšíření rozsahu stanovených těkavých látek, integraci s hmotnostní spektrometrií a automatizaci vyhodnocovacích procesů pro zvýšení throughputu a standardizaci protokolů.

Závěr

Páry kolón Zebron ZB-BAC1 a ZB-BAC2 představují optimalizované řešení pro rychlou a přesnou GC-FID analýzu obsahu alkoholu v krvi, vhodné zejména pro post mortem aplikace, kde standard n-propanol selhává.

Použitá instrumentace

• Agilent 6890 GC s Overbrook HT-200 autosamplerem
• Kapilární kolony Restek Rtx-BAC1/2, J&W DB-ALC1/2 a Phenomenex Zebron ZB-BAC1/2
• Duální FID detektory s Y-splitterem a Z-Guard ochrannými kolony

Reference

1. National Highway Traffic Safety Administration J.E. Monitoring
2. Nanikawa R, Ameno K, Hashimoto Y, Hamada K. Alcohol Levels in Skeletal Muscle. Forensic Sci Int 20, 133–140