PAH Analysis in Fatty and Complex Matrix using GC/MS/MS - Pumpkin Seed Oil

Význam tématu

Polycyklické aromatické uhlovodíky (PAH) patří mezi silné karcinogeny, které se v tucích potravin, jako je dýňový semenný olej, mohou kumulovat během pražení a lisování semen. Evropská unie proto stanovila přísné limity na obsah PAH ve výrobcích, což vyžaduje spolehlivé a citlivé analytické metody pro jejich sledování v komplexních matričních prostředích.

Cíle a přehled studie

Cílem této studie bylo ověřit využitelnost plynulého chromatografu spárovaného s trojnásobným kvadrupólem (GC/MS/MS) pro kvantitativní stanovení 16 evropských prioritních PAH v dýňovém semenném oleji. Studie sledovala dodržení požadavků na limity, obnovitelnost a přesnost analýzy podle nařízení Evropské komise č. 1881/2006.

Použitá metodika

Extrakční postup zahrnoval homogenizaci vzorku a extrakci s acetonitrilem, následovanou čištěním pomocí materiálu Enhanced Matrix Removal – Lipid (EMR-Lipid) doplněného sorbenty PSA a C18. Čištěný extrakt byl poté koncentrován a analyzován na GC/MS/MS.

Použitá instrumentace

• Chromatograf: Agilent 7890 s automatickým splitless injektorem (2 μl, 320 °C)
• Spektrometr: Agilent 7010 Triple Quadrupole s vysokovýkonovým iontovým zdrojem (300 °C)
• Čištění: EMR-Lipid dSPE, PSA a C18
• Kolona: Select PAH 30 m × 0,25 mm × 0,25 μm, helium (1,2–1,5 ml/min)
• Modifikace GC/MS: zpětné proplachování (backflush), samočisticí modul iontového zdroje (JetClean), zámek doby zdržení (retention time locking)
• Program pece: 80 °C (0,5 min), následující rampy na 120, 180, 280 až 325 °C dle optimalizovaného protokolu

Hlavní výsledky a diskuse

Obnovitelnost raných a středních elutérů se pohybovala mezi 64–94 %, u pozdních PAH byl mírně nižší rozsah 50–80 %. Relativní standardní odchylky (RSD) pro nízké (1 ppb) i vyšší hladiny (10–50 ppb) zůstaly pod stanovenými limity. Lineární kalibrační křivky vykázaly koeficienty determinace R2 > 0,99 pro všechny analyty, přesnost a opakovatelnost splňovaly požadavky EU.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlé a citlivé stanovení PAH v mastném matričním prostředí bez nutnosti rafinace oleje. S využitím EMR-Lipid a PSA/C18 se výrazně snižuje rušivý vliv lipidů, modifikace GC a MS zvyšují životnost kolony a stabilitu zdroje iontů. Kombinace je vhodná pro rutinní kontrolu kvality a plnění legislativních požadavků.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj metodiky směřuje k rozšíření aplikačního rozsahu na různé mastné a komplexní potravinářské matrice, včetně uzenin, ryb či kakaových produktů. Automatizace přípravy vzorků a integrace online čištění mohou dále zkrátit dobu analýzy a zvýšit propustnost laboratoří. Vývoj nových sorbentů a modulů GC/MS přispěje ke zvýšení citlivosti a spolehlivosti měření.

Závěr

Ověřená metoda využívající EMR-Lipid čištění a GC/MS/MS s modifikacemi JetClean, backflush a retention time locking představuje robustní a citlivý přístup pro stanovení 16 prioritních PAH v dýňovém semenném oleji. Splňuje požadavky EU na limity, přesnost i opakovatelnost analýzy.

Reference

• Application Note 5991-3003EN, Agilent Technologies
• Journal of Chromatography A 1419 (2015) 89–98
• Spolupráce s Oregon State University, Dept. of Environmental and Molecular Toxicology