Benefits of Using the Agilent EMR—Lipid Polish Pouch Protocol

Význam tématu

V analýze vysokotučných vzorků představuje selektivní odstranění lipidů klíčový krok k dosažení spolehlivých a reprodukovatelných výsledků. Konvenční techniky, jako jsou QuEChERS nebo precipitace proteinů, často vedou ke spolunosiči analytů s matricí, což komplikuje detekci a kvantifikaci stopových látek. Metoda EMR–Lipid (Enhanced Matrix Removal–Lipid) v kombinaci s doplňkovým krokem final polish pouch na bázi anhydrátního MgSO4 přináší efektivní řešení pro odstranění lipidů i zbytkové vody a solí.

Cíle a přehled studie / článku

Článek popisuje technologické vylepšení post-dSPE (dispersive solid phase extraction) protokolu EMR–Lipid pomocí nového formátu MgSO4 Final Polish Pouch. Cílem je eliminovat nevýhody původního řešení s NaCl, zejména zbytkové soli a vody při koncentraci vzorku, a zvýšit konzistenci výsledků při následných LC/MS/MS a GC/MS/MS analýzách.

Použitá metodika a instrumentace

Popisovaná metoda zahrnuje tyto kroky:

• Extrahování vzorku metodou EMR–Lipid dSPE.
• Přesun celé supernatantní fáze do centrifugační zkumavky (15 nebo 50 mL).
• Přidání obsahu 3,5 g anhydrátního MgSO4 z předváženého Polish Pouch.
• Okamžité vortexování a odstředění pro zajištění efektivního odstranění vody a nežádoucích pevných zbytků.
• Volitelný extra-dry krok: přenesení acetonitrilové fáze (~300 mg MgSO4 na 1 mL) do malé zkumavky, vortex a centrifugace.
• Příprava vzorku pro LC/MS/MS nebo GC/MS/MS analýzu (evaporace, reindikace nebo přímé naředění mobilní fází).

Instrumentace:

• Agilent Bond Elut EMR–Lipid dSPE sorbent.
• Agilent EMR–Lipid MgSO4 Final Polish Pouch (p/n 5982-0102).
• Centrifugační odstředivka a vortex.
• Kapalinový chromatograf s tandemovou hmotnostní spektrometrií (LC/MS/MS).
• Plynový chromatograf s tandemovou hmotnostní spektrometrií (GC/MS/MS).

Hlavní výsledky a diskuse

Při použití MgSO4 Final Polish Pouch došlo k:

• Odstranění více než 95 % volné vody a nežádoucích solí z extraktu.
• Odstranění zbytkových iontů NaCl, které by mohly negativně ovlivnit stabilitu sloučenin při sušení a koncentraci.
• Zlepšení tvaru peaků a citlivosti signálu zejména v GC/MS/MS analýzách díky kompletní eliminaci zbytkové vlhkosti.
• Vyšší reprodukovatelnosti mezi vícenásobnými injekcemi a delší stabilitě analytických sloupců.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Zkrácení času na manipulaci se vzorky díky možnosti dekantace celé supernatantní fáze.
• Eliminaci rizika kontaminace a absorpce vlhkosti díky uzavřenému balení MgSO4 v pouches.
• Vyšší spolehlivost výsledků v regulovaných laboratořích (QA/QC) a výzkumných aplikacích.
• Univerzální použití pro LC i GC aplikace s nízkou hladinou meziproduktů a solí.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekávaný vývoj zahrnuje:

• Integraci final polish kroků s robotizovanými platformami pro vysokoprůchodové zpracování.
• Další optimalizaci sorbentních materiálů pro selektivnější odstranění širokého spektra matričních interferencí.
• Vyvinutí analogických pouch formátů pro jiné typy analýz (např. těkavé organické sloučeniny, farmaceutické metabolity).

Závěr

Přidání anhydrátního MgSO4 Final Polish Pouch do workflow EMR–Lipid výrazně zlepšuje odstraňování vody a nežádoucích solí v konečném vzorku, aniž by utrpěla selektivita lipidů nebo obnova analytů. Metoda zvyšuje konzistenci výsledků a rozšiřuje využitelnost pro různé typy chromatografických analýz.

Reference

1. D. Lucas, L. Zhao, PAH Analysis in Salmon with Enhanced Matrix Removal, Agilent Technologies Application Note 5991-6088EN (2015).
2. L. Zhao, D. Lucas, Multiresidue Analysis of Veterinary Drugs in Bovine Liver, Application Note 5991-6096EN (2015).
3. L. Zhao, D. Lucas, Multiresidue Analysis of Pesticides in Avocado by GC/MS/MS, Application Note 5991-6097EN (2015).
4. L. Zhao, D. Lucas, Multiresidue Analysis of Pesticides in Avocado by LC/MS/MS, Application Note 5991-6098EN (2015).
5. L. Geis-Asteggiante et al., J. Chromatogr. A 1258, 43–54 (2012).