AGILENT BOND ELUT CERTIFY AND CERTIFY II METHOD MANUAL

Význam tématu

Správná a reprodukovatelná extrakce látek ze složitých biologických matric je klíčová pro forenzní toxikologii, klinickou a průmyslovou analýzu. Smíšené módy SPE sorbenty Agilent Bond Elut Certify a Certify II umožňují simultánní využití nepolárních, polárních a ion-exchamžních interakcí, což zajišťuje vysokou čistotu a stabilní výtěžky širokého spektra základních, kyselých i neutrálních drog. Díky modifikovatelnosti metod a kompatibilitě s GC, GC/MS, HPLC i LC/MS se tyto SPE systémy staly standardem v toxikologických laboratořích po celém světě.

Cíle a přehled studie / článku

Příručka prezentuje detailní workflow pro přípravu vzorků obsahujících drogy z moči, krve, plazmy či mekonia. Popisuje:

• Směsné módy extrakčních postupů pro základní drogy (Certify SPE)
• Postupy pro kyselé/neutrální látky včetně THC metabolitů (Certify II SPE)
• Optimalizaci nutričních objemů, pH, pufrů a sušení sorbentu
• Varianty derivatizace pro GC/MS a GC/FID

Použitá metodika a instrumentace

Všechny metody vycházejí z jednotného postupu:

• Podmínění SPE kolonek: methanol + vodný pufr (pH odpovídající analyzované skupině drog)
• Naložení matrice s interními standardy
• Různá fáze vymývání: vodné, organické a kyselé či zásadité pufry
• Eluce specifickým organickým rozpouštědlem se zásaditou/kysele modifikací
• Evaporace eluátu, případná derivatizace (BSTFA, MSTFA, PFPA, HFBA, TFAA apod.)

Instrumentace:

• GC a GC/MS – Agilent 5977A MSD, inertní toková cesta
• HPLC – Agilent 1260 Infinity LC
• LC/MS – Agilent 6460 Triple Quadrupole s Jet Stream
• SPE vakové a 96-well platformy – Vac Elut, VersaPlate

Hlavní výsledky a diskuse

Standardizované protokoly dosahují vysokých procent obnovy (>85 %) pro klíčové drogy a metabolity (opiáty, amfetaminy, benzodiazepiny, THC, barbituráty a další). Významným přínosem je:

• Univerzální čistící krok pro smíšené třídy
• Rychlá příprava vzorku (2–5 min/spe krok) a nízký objem matrice (0,5–5 mL)
• Kompatibilita s různými detektory a derivatizačními technikami

Přínosy a praktické využití metody

Bond Elut Certify a Certify II SPE:

• Zjednodušují validaci a rutinní provoz v toxikologických a klinických laboratořích
• Snižují riziko zkřížené kontaminace díky jednorázovým kartridžím a luer stopcock ventilům
• Podporují vysokou propustnost vzorků (12–96 paralelních extrakcí)

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další vývoj polymerních sorbentů s optimalizovanou selektivitou, úplnou automatizací 96-well platforem a integrací SPE s on-line LC/MS. Zvýší se důraz na miniaturizaci a green chemistry přístupy s nižší spotřebou organických rozpouštědel.

Závěr

Agilent Bond Elut Certify a Certify II představují univerzální a robustní platformu pro extrakci širokého spektra drog z biologických matric. Díky snadné modifikovatelnosti metod, bohaté nabídce formátů kartridžů a vysoké kvalitě výsledků se tyto sorbenty staly zlatým standardem pro forenzní a klinickou toxikologii.

Reference

• Chen, X.-H. Mixed-Mode Solid-Phase Extraction for the Screening of Drugs in Systematic Toxicological Analysis. Ph.D. Dissertation, University of Groningen, 1993.
• Hawks, R.L.; Chiang, C.N. Urine Testing for Drugs of Abuse. NIDA Research Monograph 73, 1986.
• McBay, A.J. Analytical Aspects of Drug Testing. Wiley, 1989.
• Pierce Chemical Company Handbook, 1994.
• Sadee, W.; Beelen, G.C.M. Drug Level Monitoring. Wiley, 1980.