Extraction of Illicit Drugs and Pesticides from Liver Tissue Using ISOLUTE® SLE+ Prior to GC/MS Analysis

Význam tématu

Volba správné extrakční metody pro analýzu toxických a zakázaných sloučenin v jaterní tkáni je klíčová pro forenzní, toxikologická a kontrolní laboratoře. Efektivní příprava vzorku zamezuje tvorbě emulzí, zvyšuje výtěžnost analytů a umožňuje dosažení nízkých mezí detekce před GC/MS analýzou.

Cíle a přehled studie

Studie demonstruje simultánní extrakci širokého spektra látek – amfetaminů, barbiturátů, benzodiazepinů, kokainu, ketaminu, THC a sedmi tříd pesticidů (karbamáty, organochloriny, organofosfáty, pyrethroidy, triaziny) – z homogenizované jaterní tkáně pomocí ISOLUTE SLE+ 1 mL kolonek. Cílem je dosáhnout čistých vzorků, vysokých recoveries, nízké RSD a LLOQ kolem 50 ppb.

Použitá metodika a instrumentace

Postup přípravy vzorku:

• 200 mg jater homogenizováno v Biotage Lysera s methanol–voda (50:50, 1,8 mL) a interním standardem.
• Centrifugace 13 300 rpm, 10 min, odběry 500 µL supernatantu na SLE+ kolonu.
• Eluce dichlormethanem (2×2,5 mL) do roztoku s 0,2 M HCl v methanolu.
• Odpaření, rekonstituce v etylacetátu, derivatizace MSTFA (25 µL), 30 min při 80 °C.

Použitá instrumentace:

• GC: Agilent 7890A s kolonkou DB-5 (30 m × 0,25 mm × 0,25 µm), helium 1,2 mL/min.
• MS: Agilent 5975C, zdroj 230 °C, kvadrupól 150 °C, režim SIM.

Hlavní výsledky a diskuse

Pro analyty spíkané do slepého jaterního extraktu (1000 ppb) byly dosaženy recoveries většinou >80 % s RSD <10 %. Kalibrační křivky v rozsahu 50–2500 ppb vykazovaly koeficient determinace r² mezi 0,993 a 0,9995. LLOQ se pohybovaly od 50 do 250 ppb v závislosti na sloučenině.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Vyšší efektivitu a menší spotřebu organických rozpouštědel oproti LLE.
• Sjednocenou přípravu pro řadu léků a pesticidů z jediné jaterní matrice.
• Vhodnost pro rutinní screeningové a potvrzovací analýzy s citlivostí pod 100 ppb.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozšíření může zahrnovat automatizaci SLE+, miniaturizaci procedury, adaptaci na další biologické matrix (krev, moč) nebo kombinaci s LC/MS pro polarnější látky. Vývoj rychlých on-line extrakčních modulů by dále zrychlil workflow.

Závěr

Optimalizovaný protokol ISOLUTE SLE+ pro jaterní tkáň poskytuje čisté extrakty, vysoké recoveries, nízké LLOQ a vynikající reprodukovatelnost. Je vhodný pro široké spektrum forenzních a toxikologických aplikací.

Reference

• V textu nebyly uvedeny standardní literární odkazy.