Extraction of Benzodiazepines From Human Urine Using ISOLUTE® SLE+ in Column Format Prior to GC-MS analysis

Význam tématu

Analýza benzodiazepinů v lidské moči je klíčová pro forenzní toxikologii, klinickou farmakologii i monitorování léčby. Přesné stanovení koncentrací těchto psychoaktivních léčiv umožňuje ověřit lékovou adherenci, detekovat zneužívání či kauzálně spojit substanci s nežádoucími účinky.

Cíle a přehled studie / článku

Optimalizovat a demonstrovat postup extrakce širokého spektra benzodiazepinů z lidské moči pomocí destiček ISOLUTE® SLE+ před analýzou GC-MS. Porovnat halogenované a nehalogenované extrakční rozpouštědlo a ukázat dosažené recoveries a limity stanovení.

Použitá metodika a instrumentace

Popis extrakčního postupu:

• Přídavek pufru a enzymatická hydrolýza β-glukuronidázou (H.pomatia) při 60 °C po dobu 2 h.
• Nástřik na ISOLUTE SLE+ 1 mL kolony, adsorpce 5 min a eluce 2×2,5 mL dichlormetanu nebo alternativně ethylacetátu.
• Odpaření eluátu za proudění vzduchu při 35 °C a následná derivatizace TBDMSTFA/TBDMCS.

GC-MS podmínky:

• Agilent 7890A/5975A, kolona ZB-5MSi (30 m×0,25 mm×0,25 µm) s předkolonou.
• SIM režim s rozdělením analytů do 7 skupin signálních iontů.
• Program teploty: 50 °C (1,5 min) → 150 °C @25 °C/min → 320 °C @10 °C/min (6 min).

Hlavní výsledky a diskuse

Dosažené recoveries většiny látek přes 90 % a LOQ 40 ng/mL moči. Signál-šum (S/N) u limitní koncentrace: diazepam 732, nordiazepam 821,6, alprazolam 94,9 až triazolam 406,6. Recoveries u ethylacetátu srovnatelné s dichlormetanem, přičemž etylacetát zlepšil ekologický profil metody.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Vysokou reprodukovatelnost a jednotné recoveries pro 17 benzodiazepinů.
• Rychlou a bezemulzní extrakci bez náročných fází.
• Možnost náhrady toxických halogenovaných rozpouštědel greener alternativou.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozšíření metodiky na další skupiny psychotropních látek, automatizace SLE+ extrakce v šaržových systémech a integrace s UHPLC-MS/MS pro vyšší citlivost a kratší doby analýzy. Adaptace na body-of-care platformy pro rychlé testy.

Závěr

ISOLUTE® SLE+ destičky v kombinaci s GC-MS poskytují robustní, citlivou a ekologičtější metodu pro stanovení benzodiazepinů v lidské moči. Metoda dosahuje nízkých LOQ a vysokých recoverií, což ji předurčuje k rutinnímu nasazení v toxikologických i klinických laboratořích.

Reference

Žádné explicitně uváděné literární zdroje.