The Use of ISOLUTE® HM-N for Rapid Sample Preparation

Význam tématu

Podpora rychlé a efektivní přípravy vzorků je klíčová pro zkvalitnění analýzy lipofilních látek v komplexních vodných matricích, jako jsou biologické tekutiny nebo viskózní vzorky. Tradiční kapalná extrakce je často časově náročná, náchylná k tvorbě emulzí a vyžaduje značné objemy rozpouštědel. ISOLUTE HM-N, materiál na bázi modifikované křemeliny, nabízí inertní a širokopH stabilní fázi pro jednoduchou podporovanou kapalnou extrakci (SLE), která minimalizuje tyto nevýhody.

Cíle a přehled studie

Cílem technické zprávy je představit princip, postup a výhody použití SLE pomocí ISOLUTE HM-N sloupců při rychlé extrakci vodných vzorků do organických fází. Zpráva popisuje výběr formátu sloupce, optimalizaci objemů a kroky přípravy vzorku, včetně úpravy pH pro ionizovatelné sloučeniny.

Použitá instrumentace

• ISOLUTE HM-N sloupce ve formátech od 0,3 do 20 mL kapacity.
• Biotage Gravity Rack pro zpracování až 20 sloupců současně.
• Stainless steel nebo PTFE jehly a stopcock jednotky pro odolnost vůči rozpouštědlům.

Metodika

1) Aplikace vzorku vodného roztoku (max. 75 % objemové kapacity sloupce).
2) Čekání 5–15 minut, aby se vzorek adsorboval na hydrofilní povrch.
3) Aplikace organického, s vodou nemísitelného rozpouštědla (objem dle kapacity sloupce).
4) Sbírání eluátu obsahujícího analyty.
Úprava pH vzorku (dvou pH jednotkové pravidlo) zlepšuje retenci neutrálních forem ionizovatelných sloučenin.

Hlavní výsledky a diskuse

SLE na ISOLUTE HM-N poskytuje vysokou kapacitu pro zpracování vodných vzorků bez vzniku emulzí díky tenké vrstvě vzorku na diatomické matrici a velké ploše rozhraní fází. Extrakční výtěžky jsou srovnatelné s klasickou LLE, s lepší opakovatelností a nižší spotřebou rozpouštědel. U formátů od 0,3 do 20 mL byla ověřena linearita objemu vzorku versus objem elučního rozpouštědla.

Přínosy a praktické využití

• Rychlá, snadno automatizovatelná alternativa k kapalné extrakci v nálevce.
• Minimální riziko emulzí a rozšíření do vysokopropustných LC-MS/MS a GC-MS aplikací.
• Vhodné pro biologické tekutiny, viskózní, zakalené a netypické matrice (mléko, moče, reakční směsi).
• Možnost fáze převést z vodné na organickou s cílenou eliminací vody.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozšíření formátů sloupců a integrace do robotizovaných platforem pro vysokou průchodnost analytických laboratoří. Vývoj směsí SLE fází a optimalizace pufrů pro širší spektrum ionizovatelných látek umožní aplikace v farmaceutickém vývoji, potravinářství a environmentalní analýze.

Závěr

ISOLUTE HM-N podporovaná kapalná extrakce představuje robustní, flexibilní a časově nenáročnou metodu přípravy vzorků pro analytické techniky vyžadující čisté a koncentrované extrakty lipofilních látek. Díky jednoduchému postupu a minimální spotřebě organických rozpouštědel nachází využití v řadě vědních a průmyslových oborů.

Reference

• Biotage TN118.V.1: The Use of ISOLUTE HM-N for Rapid Sample Preparation, 2020.