Automated Sample Preparation in Quality Control of Eye-Drop Formulation

Význam tématu

Automatizovaná příprava vzorků v kontrolách kvality farmaceutických formulací přináší výrazné zvýšení přesnosti a opakovatelnosti výsledků. V oblasti očních kapek, kde se pracuje s viskózními roztoky a přesné koncentrace aktivních látek jsou kritické pro bezpečnost pacienta, odstraňuje automatizace riziko chyb spojených s ručním objemovým ředěním a zkracuje dobu přípravy.

Cíle a přehled studie

Cílem prezentované studie bylo implementovat a ověřit metodu automatizované přípravy kalibračních standardů a ředění očních kapek obsahujících dva účinné látky – dexamethason a chloramfenikol – pomocí platformy Agilent 7696A Sample Prep WorkBench s vážní stanicí (WeighStation). Studie hodnotí linearitu kalibrace, opakovatelnost přípravy i možnou vzájemnou kontaminaci.

Použitá instrumentace

• Agilent 7696A Sample Prep WorkBench s WeighStation pro automatickou hmotnostní kontrolu
• Dva moduly Agilent 7693A Automated Liquid Sampler (500 µL a 50 µL stříkačky)
• Agilent 1290 Infinity HPLC systém s UV detektorem (254 nm)
• Kolona Poroshell 120, 2.1 × 400 mm, 2.4 µm

Použitá metodika

Příprava kalibračních standardů a vzorků probíhala plně automaticky s následujícími kroky:

1. Odvážení prázdných vialek se standardními zásobami (dexamethason, chloramfenikol)
2. Automatické pozastavení metody, manuální přídavek pevné fáze nebo viskózního vzorku
3. Opětovné spuštění a doplnění rozpouštědla (acetonitril/voda s 0,3% kyselinou fosforečnou)
4. Šaržové ředění pro čtyři úrovně kalibrace (16–64 µg/mL dexamethason, 80–320 µg/mL chloramfenikol)
5. Variabilní dávka 1 kapky očních kapek do vialek, opětovné vážení a 25× ředění vzorků

Podmínky chromatografie: gradient 20→50 % acetonitrilu za 5 minut, průtok 0,5 mL/min, objem injekce 1 µL.

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrace vykázala vynikající linearitu (R² > 0,999) pro obě analyzované látky. Opakovatelnost přípravy nejnižší úrovně standardu měla RSD 1,5 % pro chloramfenikol a 2,7 % pro dexamethason. Šestimocné opakování přípravy jednoho vzorku pro kontrolu vzorků mělo RSD 0,74 %. Chromatogramy pro různé typy očních kapek potvrzují přesné určení obou složek bez vzájemné kontaminace.

Přínosy a praktické využití metody

• Vysoká přesnost a opakovatelnost přípravy standardů i vzorků
• Eliminace objemové skleněné aparatury, snížení spotřeby rozpouštědel
• Rychlá a konzistentní příprava vzorků pro rutinní QC laboratoře
• Automatické sledování přesného množství přidaného vzorku i ředidla

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj automatizace přípravy vzorků směřuje k plné integraci v rámci chytrých laboratoří (smart labs), rozšíření metod na bioanalytické matrice (krevní plazma, slzy) a kombinaci s online analytickými technikami (LC–MS, sekvenční ředění).

Závěr

Implementace Agilent 7696A Sample Prep WorkBench s vážní stanicí v QC očních kapek prokázala spolehlivou automatizaci přípravy kalibrací i vzorků. Metoda zkracuje čas přípravy, minimalizuje chyby a zajišťuje vysokou kvalitu analýzy účinných látek.

Reference

• B. Tienpont, M. Rambla Alegre, F. David, P. Sandra: Automated Sample Preparation in Quality Control of Eye-Drop Formulation, Application Note 5991-3591EN, Agilent Technologies, 2014.