Analysis of THC Metabolites in Urine by GC/MS-Scan

Význam tématu

Analýza metabolitů THC v moči je klíčová pro právní medicínu, dopravní toxikologii i regulační kontroly. Konfirmace užití konopí prostřednictvím detekce delta-9-tetrahydrokanabinolu a jeho metabolitů umožňuje prokázat skutečné požití látky. GC/MS metody navíc poskytují plné hmotnostní spektrum, zvyšují spolehlivost výsledků a minimalizují riziko falešné interpretace naměřených dat.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem aplikace je představit metodu GC/MS-scan pro detekci a kvantifikaci hlavních THC metabolitů v moči při sub-ppb úrovních. Práce zahrnuje vývoj postupu předúpravy vzorku, optimalizaci chromatografických a spektrometrických podmínek, a ověření analytických parametrů jako linearita, citlivost, přesnost a opakovatelnost.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorce moči byly připraveny extrakcí kapalina–kapalina při pH 2,0–2,5 s HCl. Pro kvantifikaci sloužily značené izotopy Δ8-THC-d3, Δ9-THC-d3, Δ9-OH-THC-d3 a Δ9-THC-COOH-d3 jako vnitřní standardy.

• GC/MS přístroj: GCMS-TQ8040 NX (možno použít GCMS-QP2020 NX nebo GCMS-QP2050 NX)
• Auto-injektor: AOC-30i
• Kolona: SH-I-5Sil MS, 30 m × 0,25 mm ID, 0,25 µm
• Podmínky GC: inj. teplota 280 °C, objem 2 µL (splitless), rychlost 45,6 cm/s, tlak 250 kPa, program pece 150 °C (1 min) → 320 °C (15 °C/min, 3 min)
• MS: teplota zdroje 230 °C, rozhraní 280 °C, scan m/z 45–600, doba události 0,3 s

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla kvalitní separace deseti cílových sloučenin (THC, Δ8-THC, jejich hydroxy- a karboxymetabolity) s poměrem signál/šum >68 při 15 ng/mL. Kalibrační křivky v rozsahu 1–100 µg/mL vykázaly korelační koeficienty R ≥0,995, což prokazuje výbornou linearitu. Intra-denní opakovatelnost (n=5) ukázala přesnost 95–113 % u nízkých koncentrací (15 ng/mL) a 86–101 % u vysokých (250 ng/mL) s %RSD ≤5 %. GC/MS-scan umožňuje křížovou verifikaci na základě celého hmotnostního spektra, což zvyšuje spolehlivost konfirmace.

Přínosy a praktické využití metody

- Spolehlivá konfirmace užití konopí na úrovni ppb
- Vysoká opakovatelnost a přesnost kvantifikace
- Možnost křížové validace spektrálních dat v forenzní a klinické praxi
- Alternativa k LC-MS/MS v laboratořích disponujících GC/MS

Budoucí trendy a možnosti využití

V blízké budoucnosti lze očekávat rozšíření automatizovaných postupů předúpravy vzorků, využití hmotnostních analyzátorů s vyšším rozlišením a rychlejším skenem, a rozvoj kombinovaných metod (GC-MS/MS, LC-MS/MS) pro komplexní toxikologické vyšetření. Dále se prosazují miniaturizované systémy pro rychlé a terénní screeningy.

Závěr

Metoda GC/MS-scan prokázala svou vhodnost jako konfirmativní technika analýzy THC metabolitů v moči s plným spektrem, dobrou linearitou a citlivostí na úrovni ppb. Kvantitativní parametry a opakovatelnost potvrzují její využitelnost v forenzních i klinicko-toxicologických laboratořích.

Reference

1. II-5 Cannabis Test Methods. Pharmaceutical Society of Japan: Toxicological Test Methods and Annotations, 2017.
2. Analysis of THC Metabolites in Urine by GC-MS/MS, Application News 01-00860.