Analyze Dietary Fatty Acids, Sterols, and Lignans with an Agilent J&W DB-5ms UI Column

Význam tématu

Rychlá a přesná analýza dietních mastných kyselin, sterolů a lignanů je klíčová pro nutriční označování potravin, sledování kvality olejů a výzkum vlivu lipidů na lidské zdraví. Eliminace nutnosti převodu na metylestery šetří čas a reagencie a umožňuje širší využití analytických technik.

Cíle a přehled studie

Metodika si klade za cíl demonstrovat možnost přímé analýzy volných mastných kyselin bez tvorby FAME využitím Agilent J&W DB-5ms UI GC kolony a automatizovanou přípravou vzorků. Studie zahrnuje hydrolytické zpracování řepkového a extra panenského olivového oleje, simultánní extrakci sterolů a lignanů a monitorování reakce GC a GC/MS.

Použitá metodika a instrumentace

Analytická sestava zahrnovala:

• Agilent 7696A Prep WorkBench pro saponifikaci NaOH a extrakci hexanem
• Agilent 7890A GC s kolonom J&W DB-5ms UI (10 m × 0,25 mm, film 0,25 µm)
• Detekce FID (325 °C) pro sledování průběhu reakce a MSD Agilent 5975C s EI 350 pro identifikaci
• Podmínky GC: nosný plyn He 1,0 mL/min, program 120 °C (1 min) → 325 °C (20 °C/min, 20 min), injektor 280 °C, split/splitless
• MS: zdroj 300 °C, kvadrupól 150 °C, rozsah 30–550 m/z

Hlavní výsledky a diskuse

• Volné mastné kyseliny C12–C22 vykázaly uspokojivý tvar piků a rozlišení kritické dvojice oleová (C18:1) a stearová (C18:0)
• Sledování průběhu saponifikace ukázalo možnost dávkovat až 30 vzorků na noc bez dozoru
• Simultánní detekce sterolů (sitosterol, stigmasterol, kampesterol) a lignanů (pinoresinol, 1-acetoxypinoresinol) v originální formě
• Analýza omega-3 esterů z rybího oleje pro LC/MS s APCI prokázala kompatibilitu s dalšími technikami

Přínosy a praktické využití metody

• Eliminace derivatizačního kroku urychluje analýzu a snižuje chyby způsobené přípravou FAME
• Větší flexibilita laboratoře díky možnosti přenosu metody z GC/MS na LC/MS
• Automatizace zvyšuje propustnost a standardizaci vzorků

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření detekce na negativační ESI pro přímou analýzu organických kyselin v LC/MS
• Vývoj funkčních stacionárních fází (cyano) pro lepší separaci izomerů
• Další automatizace a mikroextrakce pro zrychlení přípravy a minimalizaci spotřeby rozpouštědel

Závěr

Kombinace Agilent J&W DB-5ms UI kolony a automatizovaného systému 7696A Prep WorkBench prokazuje spolehlivou analýzu volných mastných kyselin, sterolů a lignanů bez nutnosti přípravy FAME. Metoda poskytuje vysoce produktivní workflow a snadný přechod mezi GC a LC.

Reference

1. S. Rossi. Does Canola Oil Have Omega-6 Fatty Acids? Livestrong Foundation, 2012.
2. N. Helle, M. Bzduch, R. Veeneman. Determination of Fatty Acid Methyl Esters (FAMEs) in Salmon Oil Using Automated Sample Preparation. Agilent Technologies, Application Note 5990-9799EN, 2012.
3. M. Brenes et al. Pinoresinol and 1-acetoxypinoresinol, two new phenolic compounds identified in olive oil. J. Am. Oil Chem. Soc. 77, 715, 2000.
4. Fatty acids content in dietary fats. Wikipedia, 2023.
5. AOAC Official Method 2000.10. AOAC International, 2000.