Jak ručně vytvořit kalibraci v chromatografickém softwaru Clarity

Správná kalibrace je základním předpokladem pro kvantitativní chromatografii. Chromatografický software Clarity umožňuje vytvářet a upravovat kalibrační křivky z naměřených standardů – dokonce i zpětně. Tato příručka poskytuje podrobný, krok za krokem vedený postup, jak ručně vytvořit kalibraci z již naměřených standardů pomocí okna Calibration.

Popsaný pracovní postup je vhodný pro laboratoře provádějící analýzy GC, HPLC nebo LC/MS, kde je třeba generovat kalibrační data až po dokončení chromatografických analýz.

Potřebný software a vstupní data

Software

• Chromatografický software Clarity (kterákoli edice podporující kvantitativní kalibraci)

Předpoklady

• Chromatogramy naměřených kalibračních standardů
• Koncentrace nebo množství jednotlivých látek v každé kalibrační úrovni
• Vytvořený nebo otevřený prázdný kalibrační soubor v Clarity

Přehled pracovního postupu kalibrace

1. Otevřít prázdný kalibrační soubor
2. Načíst první standard
3. Naimportovat integrované píky do kalibrační tabulky
4. Pojmenovat látky a zadat jejich koncentrace
5. Načíst další kalibrační úroveň
6. Přidat pouze existující látky
7. Zadávat koncentrace pro všechny kalibrační úrovně
8. Propojit kalibraci s chromatogramem a ověřit výpočty

Podrobný pracovní postup

1. Otevření nebo vytvoření prázdného kalibračního souboru

V okně Calibration:

• vytvořte nový kalibrační soubor, nebo
• otevřete již připravený prázdný soubor

Tím zajistíte, že se všechny následující kroky budou zapisovat do čisté struktury kalibrace.

2. Načtěte chromatogram prvního standardu

Otevřete chromatogram odpovídající první kalibrační úrovni.

3. Přidejte všechny integrované píky

Pomocí funkce Add All:

• naimportujete všechny integrované píky do kalibrace
• všechny detekované píky se přenesou do Calibration Summary Table

Tím se vytvoří výchozí seznam látek pro kalibraci.

Poznámka:
Názvy látek jsou v celé kalibraci jednotné a nastavují se pouze jednou.

4. Přejmenujte látky (pokud je potřeba)

V Calibration Summary Table:

• přejmenujte každý pík na správný název látky
• zachovejte přesnou a jednotnou nomenklaturu – bude použita pro všechny úrovně

5. Zadejte množství látek pro 1. úroveň

Ke každé látce vyplňte:

• příslušné množství
• koncentraci
• nebo hmotnost podle prvního standardu

Tím je dokončena kalibrační úroveň 1.

6. Načtěte chromatogram druhého standardu

Otevřete chromatogram odpovídající druhé kalibrační úrovni.

Zkontrolujte nastavení v horní liště

Před přidáním píků ověřte:

• Level: 2
• Mode: Automatic
• Calibration: Enabled

Správné nastavení zajistí, že se hodnoty vloží do odpovídající kalibrační úrovně.

7. Přidejte pouze existující látky

Místo funkce Add All použijte Add Existing:

• přidají se pouze látky definované v 1. úrovni
• zachová se konzistentní identita látek napříč kalibrací

Calibration Summary Table se automaticky přepne na úroveň 2.

8. Zadejte množství látek pro 2. úroveň

Stejně jako v prvním kroku:

• doplňte množství látek pro druhý kalibrační bod

Tento postup opakujte pro všechny další kalibrační úrovně.

9. Ověřte kalibraci v okně chromatogramu

Přepněte do okna Chromatogram, kde je kalibrace propojena.

Měli byste vidět:

• správné názvy látek nad píky
• automaticky vypočtené výsledky
• kalibrační křivku aplikovanou na chromatogram

Tím ověříte, že ručně vytvořená kalibrace je aktivní a funkční.

Diskuze

Ručně vytvářená kalibrace je užitečná, když:

• standardy byly měřeny dříve než byla vytvořena kalibrace
• je potřeba rekonstruovat nebo ověřit kvantifikaci
• vyžaduje se zpětná kalibrace po revizi dat

Výhody ruční tvorby kalibrace:

• plná kontrola nad názvy látek
• možnost vyloučit nežádoucí píky
• přesné zadání všech koncentrací
• flexibilní tvorba víceúrovňových kalibrací

Závěr

Vytvoření ruční kalibrace z již naměřených standardů v Clarity je jednoduché, pokud se dodrží strukturovaný pracovní postup. Použitím funkcí Add All a Add Existing, správným přiřazením názvů látek a přesným zadáním množství pro jednotlivé úrovně lze rychle a spolehlivě vytvořit kalibrační křivky potřebné pro kvantitativní analýzu.

Tato metoda je ideální pro laboratoře, které potřebují kalibraci zrekonstruovat, upravit nebo zpřesnit mimo automatizované akviziční workflow.

Pro další návody a pokročilá školení Clarity navštivte oficiální YouTube kanál společnosti DataApex.