A GC-FID Method for the Comparison of Acid- and Base-Catalyzed Derivatization of Fatty Acids to FAMEs in Three Edible Oils

Význam tématu

Analýza mastných kyselin v potravinách je zásadní pro hodnocení nutričních vlastností, stability tuků a dodržování legislativních norem. Přeměna mastných kyselin na jejich metylestery (FAME) umožňuje citlivou a reprodukovatelnou separaci pomocí plynové chromatografie s detekcí plamenovou ionizací.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo porovnat účinnost dvou derivatizačních postupů – alkalické esterifikace s KOH/methanolem a kyselé katalýzy s BF3-methanolem – pro tři běžné tukové matrice (máslo, margarín, palmový olej). K identifikaci FAME sloužil referenční standard obsahující 37 složek s délkou uhlíkového řetězce od C4 do C24.

Použitá metodika a instrumentace

Obě metody probíhaly při 50 C po dobu 30 minut za intenzivního míchání v Reacti-Therm modulu. Po reakci se přidala voda a oddělila se organická fáze. Derivaty byly injektovány na TRACE GC Ultra s polarizovanou fází TR-FAME (100 m × 0,25 mm × 0,20 μm) a detekovány pomocí FID.

Použitá instrumentace

• TRACE GC Ultra plynový chromatograf
• TRACE TR-FAME kolona (100 m × 0,25 mm × 0,20 μm)
• Flame Ionization Detector
• TriPlus autosampler
• Reacti-Therm III topné a míchací zařízení
• Reacti-Vial reakční lahvičky

Hlavní výsledky a diskuse

Separační sloupec zajistil téměř úplné rozlišení 37 FAME, kromě několika poloisomerických kyselin C20:3 a C22:1, kde byla částečná kolice. Alkalická derivatizace vedla k pozorování menšího počtu FAME ve vzorcích a k tvorbě emulzí vyžadujících filtraci. Kyselá metoda s BF3-methanolem poskytla širší spektrum detekovaných složek bez problémů při fázi separace a s lepším tvarem píků.

Přínosy a praktické využití metody

Rychlá a efektivní tvorba metylesterů mastných kyselin výrazně zjednodušuje rutinní analýzy potravinářských tuků. Vyšší výtěžnost a čistota píků u BF3-metanolové derivatizace zkracuje čas přípravy vzorků a zvyšuje spolehlivost kvantifikace cis- a transmastných kyselin.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další optimalizace reagentů pro minimalizaci vedlejších reakcí, rozšíření metod na složitější matice s vysokým obsahem polárních lipidů a integrace s hmotnostní spektrometrií pro strukturální identifikaci neobvyklých nenasycených forem.

Závěr

Kyselá derivatizace s BF3-methanolem v kombinaci s vysokopolárním TR-FAME sloupcem představuje rychlou, robustní a univerzální metodu pro analýzu mastných kyselin v potravinářských tucích. Metoda uspokojí požadavky laboratorní rutiny i výzkumu nových zdrojů tuků.

Reference

1. Chinese Official method SN/T 1945-2007 Determination of fatty acids in food Capillary gas chromatography
2. Thermo Scientific Reagents Solvents and Accessories Brochure Ref BR20535_E 06/12S