The Analysis of Resveratrol in Red Wine by On-Fiber Derivatization/SPME

Význam tématu

Resveratrol je rostlinný polyfenol s významnými biologickými účinky včetně protirakovinných a kardioprotektivních vlastností. Jeho vyšší obsah v červeném víně podněcuje zájem o přesné a citlivé analytické metody pro stanovení jeho koncentrace v potravinářských a farmaceutických vzorcích.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo demonstrovat použití pevné fáze mikroextrakce (SPME) s on-fiber derivatizací pro extrakci a kvantitativní analýzu trans-resveratrolu v červeném víně. Studie navazuje na předchozí práce a optimalizuje podmínky pro snížení interferencí z matice vína.

Použitá metodika a instrumentace

V experimentu byly uplatněny následující podmínky extrakce a derivatizace:

• Vzorek: 3 mL červeného vína (merlot Kalifornie) naředěného 1:3 v 12% roztoku ethanolu ve vodě
• SPME vláknová fáze: 85 µm polyakryláty odolné vůči bobtnání
• Extrahování: ponoření vláken při pokojové teplotě po dobu 15 minut se mícháním 400 rpm
• On-fiber derivatizace: 20 minut v uzavřené nádobce s 5 µL Sylon-BFT (BSTFA + 1% TMCS)
• Desorpce: vstřikování do portu GC při 280 °C po dobu 2 minut

Instrumentace:

• GC-MS: kolona SLB-5ms (30 m × 0,25 mm × 0,25 µm), program pece 100 °C (1 min), 10 °C/min do 325 °C (3 min)
• MS detekce v režimu full scan m/z 40–450, rozhraní 325 °C, helium 1 mL/min

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační křivka v rozsahu 10–300 µg/L vykázala vynikající linearitu s koeficientem korelace 0,9987. Metoda umožnila detekci nejnižší úrovně standardu v režimu full scan. Analýza červeného vína prokázala koncentraci trans-resveratrolu 22,6 µg/L a při přídavku 100 µg/L spikování byla zjištěna hodnota 134,7 µg/L (110 % přesnost). Kromě trans-izomeru se v chromatogramech objevil i cis-resveratrol, pravděpodobně vzniklý izomerací během analýzy či stárnutím vína.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda SPME s on-fiber derivatizací nabízí:

• Bezrozpouštědlovou a šetrnou extrakci
• Jednoduché a rychlé zpracování vzorků
• Vysokou citlivost a kvantitativní věrnost v komplexních matricích
• Odolnost polyakryláty proti působení silylátoru

Budoucí trendy a možnosti využití

Možné směry dalšího vývoje:

• Rozšíření on-fiber derivatizace na další fenolické sloučeniny
• Integrace s multidimenzionální chromatografií pro zlepšení selektivity
• Automatizace a miniaturizace pro vysokoprůtoková laboratoř
• Využití v monitorovaných potravinářských či farmaceutických kontrolách kvality

Závěr

SPME s on-fiber silylační derivatizací v kombinaci s GC-MS se ukázala jako robustní, citlivá a kvantitativní metoda pro stanovení resveratrolu v červeném víně. Polyakryláty odolaly chemickému namáhání a umožnily spolehlivou analýzu v komplexní matrici.

Reference

1. Red Wine Compound Resveratrol Demonstrates Significant Health Benefits ScienceDaily 2009
2. Cai L Koziel JA Dharmadhikari M van Leeuwen J Rapid Determination of trans-resveratrol in red wine by solid-phase microextraction with on-fiber derivatization and multidimensional gas chromatography-mass spectrometry J Chrom A 2009 1216 281-287
3. Vinas P Campillo N Martinez-Castillo N Hernandez-Cordoba M Solid-phase microextraction on-fiber derivatization for the analysis of some polyphenols in wine and grapes using gas chromatography-mass spectrometry J Chrom A 2009 1216 1279-1284