Quantitation of NDMA and NDEA in Metformin and 5 Sartan APIs as per the EDQM method Procedure B

Význam tématu

Přítomnost N-nitrosodimethylaminu (NDMA) a N-nitrosodiethylaminu (NDEA) ve farmaceutických přípravcích představuje významné riziko pro kvalitu a bezpečnost léčiv. Zjištění těchto nitrosaminů v sartanech a metforminu vedlo k přísným regulačním opatřením. Spolehlivá a citlivá analýza umožňuje zajištění shody s limity regulačních orgánů a tím ochranu zdraví pacientů.

Cíle a přehled studie / článku

• Aplikovat EDQM Procedure B pro kvantifikaci NDMA a NDEA v API Metforminu a vybraných sartanech.
• Ověřit linearitu, citlivost (LOQ), opakovatelnost a přesnost metody na systému GCMS-QP2020 NX s autosamplerem AOC-30i.
• Srovnat dosaženou kvantifikační citlivost s hodnotami uvedenými v originální metodě EDQM a rozšířit ji na Metformin.

Použitá instrumentace

• Chromatograf-masový spektrometr: Shimadzu GCMS-QP2020 NX s autosamplerem AOC-30i
• Kolona: SH-I-624Sil MS 30 m × 0,25 mm I.D., 1,4 μm df
• Režim injekce: splitless, objem 2,0 μL
• Přenosový plyn: helium, průtok 1,0 mL/min
• Ionizace: elektronová ionizace (EI), akvizice v režimu SIM (m/z 74, 88, 102)
• Teplotní program: 40 °C (0,5 min) → +20 °C/min do 240 °C (1,8 min) → +40 °C/min do 280 °C (2,5 min)

Použitá metodika

Metoda vychází z EDQM Procedure B se dvěma přípravami vzorku. Pro Sartany a Metformin se aplikuje extrakce NaOH a následná organická fáze s DCM (postup 1). Postup 2 využívá přímou extrakci v dichlormethanu pro Candesartan a Irbesartan. Interním standardem je N-nitrosoetylmethylamin (NEMA). Kalibrace je tříbodová (15, 30, 60 ppb) pro oba přípravné postupy. Po centrifugaci se organická vrstva podrobí analýze GC-MS.

Hlavní výsledky a diskuse

• Linearity: korelační koeficienty r2 = 0,999 pro NDMA i NDEA ve všech přípravách.
• S/N: u spiked vzorků (15 ppb) bylo dosaženo S/N ≥ 10, splňující požadavky EDQM.
• Opakovatelnost: relativní standardní odchylka < 2,1 % (n = 6) pro všechny kalibrační body.
• Přesnost (recovery): 95–122 % při koncentraci 15 ppb.
• Výsledky analýzy: většina sartans a metforminu pod kvantifikačním limitem (<15 ppb), výjimkou byl Valsartan s NDMA 17,6 ppb.
• LOQ metody Shimadzu (15 ppb) je dvojnásobně citlivější než původní EDQM limit (30 ppb).

Přínosy a praktické využití metody

• Zvýšená citlivost a spolehlivost kontroly nitrosaminů v API Metforminu a sartanech.
• Nízké kvantifikační limity umožňují včasnou detekci kontaminace.
• Metoda je vhodná k rutinní implementaci v QA/QC farmaceutických laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření na další druhy nitrosaminů a farmaceutická matrix.
• Automatizace přípravy vzorků pro zvýšení propustnosti analýz.
• Implementace pokročilých detekčních technik (např. GC-MS/MS) pro další zvýšení citlivosti.

Závěr

Metoda EDQM Procedure B aplikovaná na přístroji Shimadzu GCMS-QP2020 NX s autosamplerem AOC-30i prokázala vynikající linearitu, citlivost, přesnost a opakovatelnost. Díky kvantifikačnímu limitu 15 ppb umožňuje spolehlivou detekci NDMA a NDEA v API Metforminu a sartanech a přináší vyšší kontrolu kvality oproti původním limitům EDQM.

Reference

• EDQM Guidelines – Procedure B for Nitrosamines Quantification
• Shimadzu Application News 06-SAIP-GC-030-EN, First Edition: Feb. 2023