SLAS: AUTOMATION OF BIOANALYTICAL SAMPLE EXTRACTION TECHNIQUES USING ANDREW+™ PIPETTING ROBOT WITH THE EXTRACTION+ CONNECTED DEVICE
Postery | 2023 | WatersInstrumentace
Bioanalytická příprava vzorků je klíčovým krokem pro získání čistých, citlivých a reprodukovatelných dat v LC-MS analýzách léčiv a biomarkerů. Ruční postupy mohou být časově náročné a náchylné ke variabilitě mezi uživateli a laboratořemi. Automatizace těchto operací přispívá ke zvýšení efektivity, konzistence výsledků a volnému času pro vědecké aktivity s vyšší přidanou hodnotou.
Cílem této práce bylo plně automatizovat extrakci terapeutického činidla apixabanu z lidské plazmy. K tomu byl využit pipetovací robot Andrew+ s připojitelným modulem Extraction+ a webovým softwarem OneLab. Studie porovnávala širokou škálu bioanalytických technik: proteinovou precipitaci, odstranění fosfolipidů, SSLE, reverzní fázi SPE, SPE s odstraněním fosfolipidů a smíšené režimy SPE.
Roztok apixabanu a izotopově značeného interního standardu (13C-d3) byl připraven v methanolu a dále naředěn v plazmě pro kalibrační křivky a QC vzorky. Extrakce probíhala plně automatizovaně podle doporučení výrobců jednotlivých destiček a cartridgí (Sirocco, Ostro, Oasis HLB, Oasis HLB PRiME, Oasis MCX, Oasis WAX). Robot všechny pipetovací kroky, vakuační podmínky i sběr eluátu realizoval bez nutnosti manuálního zásahu. Separace na UPLC probíhala lineárním gradientem 5–100 % acetonitrilu s 0,1% kyselinou mravenčí za 4 minuty.
Všechny testované extrakční metody dosáhly výborné lineárity (R2 > 0,986), přesnosti a preciznosti v rámci ±15 %. Recovery se pohybovalo od přibližně 77 % u PPT s odstraněním PL až po více než 100 % u smíšeného režimu MCX. Odstranění fosfolipidů výrazně snížilo matriční efekty, nejnižší byl vliv matice u PRiME HLB.
Automatizace minimalizuje lidské chyby, zkracuje přípravu vzorků a zaručuje konzistentní výsledky mezi různými operátory. Flexibilní platforma umožňuje rychlou implementaci různých extrakčních protokolů bez nutnosti rozsáhlého vývoje metod.
Další rozšíření se očekává v integraci s robotizovanou manipulací s více typy matric, aplikaci strojového učení pro optimalizaci protokolů či propojení s on-line detekčními systémy. Miniaturizace a microfluidické moduly mohou dále snížit spotřebu vzorku a reagencií.
Andrew+ Pipetting Robot s Extraction+ Connected Device a OneLab softwarem efektivně automatizoval široké spektrum bioanalytických extrakcí, dosáhl vysoké kvality dat a umožnil snadnou implementaci bez rozsáhlého vývoje. Tento přístup významně zvyšuje produktivitu a spolehlivost bioanalytických laboratoří.
Příprava vzorků
ZaměřeníVýrobceWaters
Souhrn
Význam tématu
Bioanalytická příprava vzorků je klíčovým krokem pro získání čistých, citlivých a reprodukovatelných dat v LC-MS analýzách léčiv a biomarkerů. Ruční postupy mohou být časově náročné a náchylné ke variabilitě mezi uživateli a laboratořemi. Automatizace těchto operací přispívá ke zvýšení efektivity, konzistence výsledků a volnému času pro vědecké aktivity s vyšší přidanou hodnotou.
Cíle a přehled studie / článku
Cílem této práce bylo plně automatizovat extrakci terapeutického činidla apixabanu z lidské plazmy. K tomu byl využit pipetovací robot Andrew+ s připojitelným modulem Extraction+ a webovým softwarem OneLab. Studie porovnávala širokou škálu bioanalytických technik: proteinovou precipitaci, odstranění fosfolipidů, SSLE, reverzní fázi SPE, SPE s odstraněním fosfolipidů a smíšené režimy SPE.
Použitá instrumentace
- Pipetovací robot Andrew+ s Extraction+ Connected Device a vakuovým čerpadlem
- Software OneLab pro tvorbu a řízení protokolů
- LC-MS/MS systém Waters Xevo TQ-XS s ESI+ detekcí
- UPLC ACQUITY I-Class PLUS se sloupcem BEH C18 (1,7 µm, 2,1×50 mm)
Použitá metodika
Roztok apixabanu a izotopově značeného interního standardu (13C-d3) byl připraven v methanolu a dále naředěn v plazmě pro kalibrační křivky a QC vzorky. Extrakce probíhala plně automatizovaně podle doporučení výrobců jednotlivých destiček a cartridgí (Sirocco, Ostro, Oasis HLB, Oasis HLB PRiME, Oasis MCX, Oasis WAX). Robot všechny pipetovací kroky, vakuační podmínky i sběr eluátu realizoval bez nutnosti manuálního zásahu. Separace na UPLC probíhala lineárním gradientem 5–100 % acetonitrilu s 0,1% kyselinou mravenčí za 4 minuty.
Hlavní výsledky a diskuse
Všechny testované extrakční metody dosáhly výborné lineárity (R2 > 0,986), přesnosti a preciznosti v rámci ±15 %. Recovery se pohybovalo od přibližně 77 % u PPT s odstraněním PL až po více než 100 % u smíšeného režimu MCX. Odstranění fosfolipidů výrazně snížilo matriční efekty, nejnižší byl vliv matice u PRiME HLB.
Přínosy a praktické využití metody
Automatizace minimalizuje lidské chyby, zkracuje přípravu vzorků a zaručuje konzistentní výsledky mezi různými operátory. Flexibilní platforma umožňuje rychlou implementaci různých extrakčních protokolů bez nutnosti rozsáhlého vývoje metod.
Budoucí trendy a možnosti využití
Další rozšíření se očekává v integraci s robotizovanou manipulací s více typy matric, aplikaci strojového učení pro optimalizaci protokolů či propojení s on-line detekčními systémy. Miniaturizace a microfluidické moduly mohou dále snížit spotřebu vzorku a reagencií.
Závěr
Andrew+ Pipetting Robot s Extraction+ Connected Device a OneLab softwarem efektivně automatizoval široké spektrum bioanalytických extrakcí, dosáhl vysoké kvality dat a umožnil snadnou implementaci bez rozsáhlého vývoje. Tento přístup významně zvyšuje produktivitu a spolehlivost bioanalytických laboratoří.
Reference
- Danaceau JP; Trudeau ME. Automation of Bioanalytical Sample Extraction Techniques using Andrew+ Pipetting Robot with the Extraction+ Connected Device. Waters Corporation, Milford, MA, USA, 2023.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
Sample Preparation and Laboratory Automation
2023|Waters|Ostatní
Sample Preparation and Laboratory Automation Sample Preparation and Laboratory Automation Contents Goals of Sample Preparation........................5 Benefits of Solid-Phase Extraction............5 PoraPak Rxn Cartridges for Post-Synthesis Cleanup................................34 Vacuum Manifold and Accessories........35 Selecting the Correct SPE Format.............6 Vacuum Manifold for Use with SPE…
Klíčová slova
oasis, oasishlb, hlbcartridge, cartridgesep, seppak, pakmcx, mcxprime, primesorbent, sorbentcartridges, cartridgesmax, maxwcx, wcxsilica, silicaplate, platedescription, descriptionwwptfe
OASIS SOLID-PHASE EXTRACTION PRODUCTS
2020|Waters|Brožury a specifikace
[ OASIS SOLID-PHASE EXTRACTION PRODUCTS ] Simplifying Solid-Phase Extraction Through the combination of innovative sorbent technology and hardware design, Oasis® Products have become the first choice in solid-phase extraction (SPE). Oasis Products are trusted by separation scientists across the globe…
Klíčová slova
oasis, oasishlb, hlbcartridge, cartridgemcx, mcxmax, maxprime, primewcx, wcxplate, platewax, waxflangeless, flangelesssolid, solidextraction, extractionµelution, µelutionformat, formatphase
Waters Extraction+
2022|Waters|Příručky
[ ORDERING INFORMATION ] Hands-free SPE, Made Easy Extraction+ Experience an all-new approach to SPE by fully automating your Extraction workflows. Combine the Extraction+ connected device to an Andrew+ pipetting robot and enjoy the simplicity of streamlined, automated SPE from…
Klíčová slova
extraction, extractiondomino, dominomanifold, manifoldcollar, collarordering, orderinglifter, liftergripper, gripperwxlxh, wxlxhkit, kitvacuum, vacuumcollection, collectioninformation, informationplate, platepump, pumprack
Andrew+ Pipetting Robot for PeptideWorks (ORDERING INFORMATION)
2023|Waters|Ostatní
[ ORDERING INFORMATION ] Andrew+ Pipetting Robot for PeptideWorks SIMPLIFY YOUR PEPTIDE MAPPING SAMPLE PREPARATION Core System: Automation of complex sample preparation procedures can improve accuracy, repeatability, and reproducibility; easing the burden of analytical method validation. Peptide mapping is one…
Klíčová slova
peptideworks, peptideworksdomino, dominoonelab, onelabkit, kitandrew, andrewpart, partmicroplate, microplatenumber, numberproduct, producttryptic, trypticadaptor, adaptorcloud, clouddescription, descriptionserver, serverprotocols
