Analysis of Phencyclidine in Urine to U.S. SAMHSA Guidelines with LC/MS/MS and GC/MS

Význam tématu

Analýza phencyclidinu v moči je klíčová pro forenzní a klinickou toxikologii zejména v souladu s americkými směrnicemi SAMHSA s limitem 25 ng mL. Přechod na LC MS MS nabízí alternativu ke klasické GC MS detekci a zvyšuje flexibilitu laboratoří.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo ověřit univerzální postup extrakce phencyclidinu z lidské moči pomocí Agilent Bond Elut Certify mixed mode SPE a následnou analýzu na platformách LC MS MS a GC MS se split a splitless injekcí. Studie hodnotila linearitu, citlivost, přesnost a opakovatelnost metody.

Metodika a použitá instrumentace

Prozpracování vzorků:

• 1 mL moče s přidaným PCP a interním standardem PCP d5
• úprava pH fosforecitanem draselným na 6,0
• podmínění SPE cartridgí MeOH a 100 mM KH2PO4
• naložení vzorku, promytí 5 % octanem kyseliny a methanolem
• eluce 2 mL acetonitrilu s 2 % NH4OH, sušení a rekonstituce pro LC MS MS v 30 70 ACN voda s 0,1 % kyselinou mravenčí, pro GC MS v hexanu

Instrumentace:

• LC MS MS Agilent 1260 Infinity s 6460 Triple Quadrupole ESI JetStream, kolona Diphenyl 2,0×50 mm
• GC MS Agilent 7890A s 5975C MSD, kolona DB-5ms 15 m×0,25 mm, split a splitless injekce

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační závislosti byly lineární v rozsahu 1–500 ng mL s koeficientem R2 > 0,9996. LOQ bylo 1 ng mL pro LC MS MS a 5 ng mL pro GC MS. Obnova phencyclidinu dosahovala 95–101 % a relativní standardní odchylka RSD byla pod 4,4 %. Všechny QC vzorky spadaly do povolené tolerance ± 20 %. Chromatogramy prokázaly čistou separaci PCP i interního standardu na všech platformách.

Přínosy a praktické využití metody

Jednotný postup SPE umožňuje použití jednoho protokolu pro různé analytické přístroje, šetří čas i spotřebu organických rozpouštědel a vyhovuje požadavkům forenzních laboratoří na citlivost, přesnost a environmentální ohledy.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření metody na další skupiny látek v toxikologii, větší automatizace SPE kroků, miniaturizace a nasazení rychlejších a vyšších rozlišení hmotnostních spektrometrů. Potenciální je integrace do komplexních multireziduálních screeningů.

Závěr

Agilent Bond Elut Certify mixed mode SPE se ukázala jako robustní a univerzální metoda extrakce phencyclidinu z moči. Analýza na LC MS MS i GC MS vykazuje vynikající linearitu, citlivost i reprodukovatelnost a splňuje americké směrnice SAMHSA.

Reference

• A Ishii et al Int J Legal Med 108 244 1996
• C Moore C Coulter K Crompton Detection of Phencyclidine in Human Oral Fluid Using Solid Phase Extraction and Liquid Chromatography with Tandem Mass Spectrometric Detection Application note Agilent Technologies Publication 5989-8084EN 2008