Workflow Solutions for Peptide Therapeutics - Application Compendium

Význam tématu

Peptidová terapeutika, zejména GLP-1 agonisté, jsou klíčová pro léčbu diabetu 2. typu a obezity. Přesná analýza kvality, čistoty, struktury a stability peptidových léků zajišťuje jejich bezpečnost a účinnost.

Vzrůstající poptávka po generických peptidových léčivech vyžaduje striktní dodržování farmaceutických norem (USP/ICH), což podněcuje vývoj pokročilých analytických metod.

Cíle a přehled studie

Kompendium představuje end-to-end řešení Agilent pro charakterizaci peptidek od ověření surovin až po finální kontrolu kvality. Zaměřuje se na GLP-1 agonisty, ukazuje klíčové analytické pracovní postupy, aplikační poznámky a použitá zařízení.

Použitá metodika a instrumentace

• Reverzní fázová chromatografie (RP-LC/UV, LC/MS) a LC/Q-TOF (Agilent 6545XT AdvanceBio LC/Q-TOF, 1290 Infinity II Bio 2D-LC)
• Preparativní HPLC: 1290 Infinity II preparative LC a LC/MSD
• Size-exclusion chromatografie (AdvanceBio SEC, 1290 Infinity II bio 2D-LC + InfinityLab LC/MSD XT)
• Triple quadrupole MRM kvantifikace (6495D LC/TQ)
• Electron capture dissociation (ExD cell) s ExDViewer softwarem
• Spektroskopie: Raman (Vaya Raman), FTIR (Cary 630), UV–Vis (Cary 3500), OPA derivatizace (AdvanceBio AAA)
• Automatizovaná příprava vzorků (AssayMAP Bravo)
• Datová správa: Agilent SLIMS (LIMS + ELN)

Hlavní výsledky a diskuse

• Škálování metod z analytické na preparativní RP-LC bez úprav gradientu
• Přesná lokalizace modifikací a izomerů peptidů pomocí ECD/CID a ExDViewer
• Identifikace agregátů GLP-1 analogů v 2D-LC/MS s dekonvolucí spekter
• Citlivá kvantifikace oxidovaných a nativních forem tirzepatidu (LOQ 0,025 ng/mL)
• Stability studie liraglutidu a semaglutidu v různých degradačních podmínkách
• Rychlá konfirmace intaktní hmotnosti GLP-1 analogů pomocí InfinityLab LC/MSD iQ
• Efektivní identifikace surovin pro syntézu peptidů Raman spektroskopií

Přínosy a praktické využití metody

• Komplexní end-to-end analytické workflow od surovin k finálnímu QC
• Regulační shoda podle USP <1503>, USP <467>, Ph. Eur. a FDA ANDA
• Automatizace přípravy vzorků minimalizuje chyby a zvyšuje reprodukovatelnost
• Rychlejší vývoj metod díky modulárním LC přístrojům (BlendAssist, Quick Change Valve)
• Přenositelnost metod napříč systémy a platformami

Budoucí trendy a možnosti využití

• Nasazení 2D-LC a iontové mobility pro lepší separaci izomerů
• Využití full-spektrových detektorů a AI pro automatizovanou interpretaci dat
• Hromadné automatizované platformy pro high-throughput screening
• Integrace LIMS/ELN s IoT a prediktivní údržbou laboratoře
• Vývoj nano-LC/MS a mikrofluidických systémů pro minimální spotřebu vzorku

Závěr

Komplexní portfolio analytických metod Agilent umožňuje laboratorím kontrolovat kvalitu peptidových terapeutik na všech úrovních vývoje. Díky citlivému LC/MS, spektroskopii a automatizaci přípravy vzorků lze splnit přísné regulační požadavky, zkrátit čas vývoje a zajistit bezpečnost i účinnost nových léků.

Reference

• Biological Activities of GLP-1, omicsonline.org
• Agilent aplikační poznámky 5994-6087EN, 5994-7727EN, 5994-7992EN, 5994-7500EN, 5994-7415EN, 5994-7610EN
• USP <1503> General Chapter, USP <467>, European Pharmacopoeia