Using the Agilent 7696A Sample Prep WorkBench for the analysis of estrone by GC Triple Quadrupole Mass Spectrometry

Význam tématu

Endokrinní disruptory jako estron představují významný environmentální a zdravotní problém díky své perzistenci a účinkům v nízkých koncentracích. Detekce a kvantifikace těchto látek ve vodních vzorcích je klíčová pro sledování jejich šíření a hodnocení rizik pro ekosystémy i lidské zdraví.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo demonstrovat využití automatizovaného pracovního stanoviště Agilent 7696A Sample Prep WorkBench pro přípravu vzorků a kalibrátorů estronu a následnou analýzu metodou GC/MS/MS na triple kvadrupólovém systému. Studie hodnotila obnovu, preciznost, linearitu kalibrace a hranici detekce.

Použitá metodika

Vzorky a kalibrátory estronu byly připraveny z matečné acetonitrilové zásobní roztoku. Pro derivatizaci bylo použito BSTFA/TCMS v pyridinu a acetonitrilu zahřívaných při 60 °C po dobu 30 minut. Při koncentraci vzorků byla aplikována 1 000násobná koncentrace (1 L na 1 mL). Injekce se prováděla v režimu studeného bezdělení (cold split–less) objemem 2 µL.

Použitá instrumentace

• Agilent 7696A Sample Prep WorkBench pro automatizovanou přípravu vzorků a derivatizaci
• GC Agilent 7890A s multi-mode inlet (MMI) pro studené split-less injekce
• Kolony HP-5MS UI (dva spojeny pomocí Purged Ultimate Union)
• Triple kvadrupólový hmotnostní spektrometr Agilent 7000B v režimu EI a MRM
• Použití helia jako nosného plynu a kryogenního zamrazování pro zaostření analyz

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační křivka ve spektru 1,0–50,0 ng/mL vykázala výbornou linearitu (R2 = 0,996). Při nejnižší úrovni 1,0 ng/mL byl dosažen signál-šum S/N nad 9 a průměrná obnova 113 % s RSD 6,9 %. Celková průměrná preciznost v pěti úrovních činila 5,16 % RSD. Na základě statistické metody Studentova t-rozdělení a RSD 6,89 % byl odhadnut instrumentální limit detekce 0,48 pg na koloně (odpovídá MDL 0,7 ng L−1).

Přínosy a praktické využití metody

Automatizace pomocí 7696A významně snižuje čas operátora, minimalizuje chyby při pipetáži a zaručuje reprodukovatelné výsledky. Metoda je vhodná pro rutinní monitoring vodních zdrojů, farmaceutický výzkum i studie expozice endokrinním disruptorům.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další rozšíření panelu analyzovaných hormonů včetně steroidních metabolitů
• Integrace online extrakce a čištění vzorků (SPE, QuEChERS) pro zrychlení workflow
• Použití stabilně značených interních standardů pro vyšší přesnost kvantifikace
• Vývoj miniaturizovaných a zelených metod s nižší spotřebou rozpouštědel
• Využití pokročilé datové analýzy a umělé inteligence pro interpretaci výsledků

Závěr

Studie prokázala, že automatizované pracovní stanoviště Agilent 7696A Sample Prep WorkBench v kombinaci s GC/MS/MS umožňuje spolehlivou, přesnou a vysoce reprodukovatelnou analýzu estronu ve stopových koncentracích. Metoda splňuje požadavky na vysoký průtok vzorků i přísné kritérium citlivosti a přesnosti.

Reference

1. Trinh T. et al Simultaneous determination of estrogenic and androgenic hormones in water by isotope dilution gas chromatography–tandem mass spectrometry J Chrom A 1218 (2011) 1668–1676
2. Wells G Prest H Russ CW Why use signal-to-noise as a measurement of MS performance when it is often meaningless Agilent Application Note 5990-8341EN (2011)