Determination of Melamine, Ammeline, Ammelide and Cyanuric Acid in Infant Milk-Based Formula and Other Food and Feed Products Using the 300-MS Triple Quadrupole GC/MS/MS

Význam tématu

Analýza melaminu a jeho analogů v potravinách a krmivech je klíčová pro ochranu zdraví, zejména u kojeneckých výživ a doplňkových bílkovinných výrobků. Neočekávaná kontaminace v mléčných formulech vedla k masovému onemocnění dětí a ukázala nutnost spolehlivých metod pro detekci stopových hladin těchto látek.

Cíle a přehled studie / článku

Tato studie si klade za cíl vyvinout a ověřit kvantitativní metodu pro současné stanovení melaminu, ammeline, ammelidu a kyseliny cyanurové v kojeneckých formulích i dalších potravinářských a krmivářských matricích pomocí GC/MS/MS s trojitou kvadrupólní detekcí.

Použitá instrumentace

• Bruker 300-MS trojitý kvadrupól GC/MS/MS
• 450-GC plynový chromatograf
• CTC Analytics Combi PAL autosampler
• Pierce Reacti-Therm/Reacti-Vap systém pro přípravu vzorků

Metodika

Vzorky (cca 0,5 g) se extrahovaly směsí diethylamin/voda/acetonitril (10:40:50), poté se prováděla sonikace a centrifugace. Supernatant se filtroval a 200 µl filtru se sušilo pod dusíkem. Derivatizace proběhla v pyridinu s BSTFA+1 % TMCS při 70 °C po dobu 45 minut. GC podmínky zahrnovaly kolonu VF-5ms (30 m × 0,25 mm × 0,25 µm), splitless injekci 1 µl, program pece od 75 do 320 °C. MS/MS využilo režim MRM s optimalizovanými předvýběrovými a produktovými ionty a kolizními energiemi.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje vynikající linearity (korelační koeficienty > 0,99) v rozsahu 0,1–1000 ppb pro melamin a analogy. Mezná koncentrace se pohybuje až na 0,002 µg/g vzorku. Oddělení derivátů je čisté, chromatogramy (TIC/MRM) prokázaly selektivní identifikaci při 2 ppb. Testované matice (suché krmivo, kojenecká formule) vykazovaly recoverie 90–120 % a nevznikaly významné matricové rušení. Ionové poměry splňují kritéria čínské národní normy pro relativní směrodatnou odchylku.

Přínosy a praktické využití metody

• Extrémně nízká detekční hranice vhodná pro regulace FDA a čínské normy
• Vysoká selektivita díky režimu MS/MS eliminující interferenci matrice
• Robustnost napříč různými matricemi potravin a krmiv
• Vhodnost pro rutinní kontrolu kvality a bezpečnosti potravin

Budoucí trendy a možnosti využití

• Automatizace a vysokopropustné přípravné systémy pro rychlejší analýzy
• Rozšíření panelu detekovaných analogů a dalších kontaminantů
• Integrace s LC-MS/MS pro komplementární metody analýzy
• Vývoj zelenějších extrakčních a derivatizačních postupů

Závěr

Popsaná GC/MS/MS metoda s trojitým kvadrupólem poskytuje ultra-stopovou detekci melaminu a souvisejících látek s vysokou spolehlivostí a opakovatelností. Splňuje i přísné regulační požadavky a je vhodná pro široké uplatnění v analytických laboratořích.

Reference

1. Interim melamine and analogues safety/risk assessment, US FDA, 2008
2. Litzau J.J., Mercer G.E., Mulligan K.J., GC-MS Screen for Melamine, Ammeline, Ammelide and Cyanuric Acid, US FDA Laboratory Information Bulletin No. 4423, 2008
3. Determination of melamine in raw milk and dairy products, China National Standard, 2008