Analyzing Pesticide Residues in Lettuce by the EN 15662 Method using Phenomenex roQ™ QuEChERS Kits Followed by LC/MS/MS and GC/MS Analysis

Význam tématu

Analýza reziduí pesticidů v potravinách je klíčová pro ochranu zdraví spotřebitelů a dodržení mezinárodních norem maximálních reziduí. Metoda EN 15662 založená na přístupu QuEChERS nabízí univerzální, rychlý a efektivní postup pro odbourání matričních interferencí, zejména u vodnatých a vláknitých vzorků jako je listová zelenina. Vysoký počet analyzovaných látek v jedné analýze významně zvyšuje laboratorní produktivitu a snižuje náklady na rutinní QA/QC kontroly.

Cíle a přehled studie

Studie popisuje ověření metody EN 15662 pro stanovení 25 pesticidů a dvou vnitřních standardů v hlávkovém salátu. Vzorky byly připraveny pomocí Phenomenex roQ QuEChERS EN 15662 Extraction Kit a roQ dSPE Kit a poté analyzovány dvěma komplementárními technikami: LC/MS/MS a GC/MS. Cílem bylo dosáhnout vysokých a reprodukovatelných výtěžků (70–120 %) při variabilitě pod 15 % a splnit požadavky na limity kvantifikace pod hodnotami MRL.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky salátu byly zmraženy v tekutém dusíku a homogenizovány. Dalších 10 g homogenátu bylo extrahováno 10 mL acetonitrilu s přídavkem směsi solí (4 g MgSO4, 1 g NaCl, 1 g trisodného citrátu, 0,5 g hydrogenuhličitanu disodného). Po odstředění se 6 mL organické fáze ošetřilo dSPE sorbenty (900 mg MgSO4 a 150 mg PSA). Část extraktu (250 µL) byla evaporována a převedena do mobilní fáze pro LC/MS/MS, zbytek (2,25 mL) do toluenu pro GC/MS.
Instrumentace:

• LC/MS/MS: Agilent 1200 LC, kolona Luna 3 µm C18(2) 150×3,0 mm, API 4000 triple quad, ESI + v režimu MRM.
• GC/MS: Agilent 6890 GC s 5973 MSD, kolona Zebron ZB-5MSi Guardian™ 30×0,25 mm×0,25 µm, splitless injekce, He 1,0 mL/min.

Hlavní výsledky a diskuse

Použitím roQ QuEChERS kitů byly u většiny pesticidů dosaženy výtěžky mezi 76 a 115 % se vzorkovými RSD pod 15 %. Výjimkou byla pymetrozin, u níž metoda EN 15662 rovněž vykazuje nižší výtěžky vzhledem k acidolabilní povaze látky. LC/MS/MS poskytlo vynikající separaci a citlivost pro polaritu různého rozsahu, včetně středně polárních sloučenin (kresoxim-metyl, tolyfluanid, tebuconazol). GC/MS zobrazil ostré symetrické píky i pro rané eluenty polaritních pesticidů. RoQ sadou předvážených solí, samostatnými 50 mL centrifugačními trubicemi a snadno odměřitelnými sorbenty se dosahuje vyšší reproducibility a provozní efektivity.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a univerzální příprava více tříd pesticidů v jednom protokolu.
• Minimalizace matričních interferencí zlepšuje životnost kolony a snižuje údržbu systému.
• Vysoká míra recovery a nízká variabilita umožňují spolehlivou rutinní kontrolu v laboratořích QA/QC, potravinářské a environmentální analytice.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj metodiky směřuje k automatizaci přípravy vzorků, zavádění miniaturizovaných QuEChERS formátů a integraci vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrie. Využití dSPE kombinace sorbentů může být optimalizováno pro širší spektrum matric, včetně vysoce pigmentovaných potravin. Digitální sledování dat a přímé napojení na LIMS podpoří rychlou validaci a adaptaci nových analytických panelů.

Závěr

Phenomenex roQ QuEChERS EN 15662 Extraction Kit a roQ dSPE Kit prokázaly v analýze hlávkového salátu vysokou účinnost a reprodukovatelnost stanovení 25 pesticidů. Komplementární použití LC/MS/MS a GC/MS zajišťuje rozsáhlé analytické krytí různých chemických tříd. Metoda splňuje požadavky na MRL a představuje spolehlivý protokol pro rutinní testování reziduí pesticidů.

Reference

• www.fda.gov
• Lehotay SJ, de Kok A, Hiemstra M, van Bodegraven P. Validation of a Fast and Easy Method for the Determination of Residues from 229 Pesticides in Fruits and Vegetables Using Gas and Liquid Chromatography and Mass Spectrometric Detection. J AOAC Int. 2005;88(2):595–614.
• USDA ARS. Pesticide Data Program. www.ars.usda.gov