Drugs of Abuse in Urine by SAMHSA Protocol

Význam tématu

Monitorování drog v moči představuje klíčový prvek v bezpečnosti práce, forenzní analýze i léčbě závislostí. Potvrzovací testy podle protokolu SAMHSA zajišťují spolehlivou identifikaci pětice hlavních skupin látek (amfetaminy, kokain, opiáty, fencyklidin, kanabinoidy). Použití chromatografie s hmotnostní spektrometrií přináší vysokou citlivost, selektivitu a právní obhajitelnost výsledků.

Cíle a přehled studie

Cílem aplikace bylo vyvinout a validovat GC/MS metodu pro kvantifikaci kodeinu, morfinu a 6-acetylmorfinu v moči s kvantifikačním prahovým limitem odpovídajícím požadavkům SAMHSA (2000 ng/ml pro kodein a morfin, 10 ng/ml pro 6-acetylmorfin). Studie popisuje kompletní workflow od přípravy vzorku až po generování tříiontové poměrné hlášení (three-ion-ratio reporting).

Použitá metodika a instrumentace

Postup přípravy vzorku:

• Přidání deuterovaných interních standardů
• Úprava pH moči a hydrolýza (enzymatická nebo acidní) pro uvolnění konjugátů
• Extrahování pomocí SPE sloupců C18-S
• Sušení eluátu a derivační reakce (PFPA pro opiáty, alternativně BSTFA/TMCS pro rychlou přípravu)
• Rekognstituování do organického rozpouštědla a injekce 1–3 µl do GC/MS

Instrumentace:

• PerkinElmer Clarus 680 GC s tlakově pulzním splitless vstřikem, kolona Elite-5 (12 m×0,2 mm×0,33 µm)
• PerkinElmer SQ8 MS v režimu elektronové ionizace, SIM s vyhodnocením tří iontů pro každý analyt

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje limitu kvantifikace 20 ng/ml a detekce pod 2 ng/ml z 1 ml moči. Linearita je potvrzena v rozsahu 20 ng/ml až 20 000 ng/ml s korelačním koeficientem R2 přes 0,999. Chromatogramy pro kodein, morfin i 6-acetylmorfin vykazují úzké špičky a stabilní tříiontové poměry v toleranci ±20 %.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí vysokou průkaznost, splňuje právní požadavky pro pracovní screening i forenzní aplikace. Díky krátké koloně a rychlému chlazení peci je dosaženo vysoké propustnosti laboratoře. Použití deuterovaných interních standardů minimalizuje matrixové efekty a zvyšuje přesnost kvantifikace.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření panelu analyzovaných látek včetně syntetických opioidů a nových psychoaktivních látek
• Integrace GC/MS workflow s LC/MS/MS pro komplexní dopingové a toxikologické screeningy
• Automatizace přípravy vzorků a pokročilá softwarová integrace pro reporting tří-iontových poměrů

Závěr

Vyvinutá metoda GC/MS pro potvrzení opiátů splňuje přísné limity SAMHSA, poskytuje robustní kvalitu dat a je vhodná pro forenzní, výzkumné i rutinní laboratoře. Krátký čas analýzy a možnost přizpůsobení reportingu tří iontů zajišťují rychlý a spolehlivý výstup dat.

Reference

1. Disposice toxických drog a chemikálií v lidském organismu, 8. vydání, Randall C. Baselt, Biomedical Publications, 2008
2. Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs, Fed Reg, 73:71857, 2008
3. Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs, Fed Reg, 75:22809, 2010
4. Pierce Catalog, Rockford IL