Benzoylecgonine in Urine by SAMHSA GC/MS

Význam tématu

Detekce benzoylecgoninu, hlavního metabolitu kokainu, v moči je zásadní pro zajištění integrity pracovního prostředí i klinické a forenzní diagnostiky. Metoda splňuje přísné požadavky americké agentury SAMHSA na dvoufázové testování (screening imunotestem a potvrzovací GC/MS).

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout rychlou, citlivou a vysoce specifickou metodu potvrzení přítomnosti benzoylecgoninu v moči s kvantifikačním limitem 100 ng/mL dle Mandatory Guidelines pro federální testy. Studie demonstruje kompletní workflow od odběru vzorku až po výslednou zprávu.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda kombinuje následující kroky:

• Kalibrace a přidání deuterovaného interního standardu (d3-BE).
• Úprava pH vzorku na 6 pomocí fosfátového pufru.
• Extrakce pomocí SPE C18 polymerního kartáčku.
• Derivatizace PFPA nebo alternativně BSTFA s TMCS.
• Analýza na GC/MS s pulzním splitless vstřikem a monitorováním tří SIM iontů (20–50 ms na iont).

Klíčová instrumentace:

• GC: PerkinElmer Clarus 680 s kolonkou Elite-5 (5 % fenyl/95 % methyl-siloxan, 12 m × 0,2 mm × 0,33 µm).
• Injektor: tlakem pulzní splitless, 250 °C.
• MS: PerkinElmer Clarus SQ 8 turbomolekulární pumpa 255 L/s, EI režim.

Hlavní výsledky a diskuse

Limit kvantifikace dosahuje 10 ng/mL z 1 mL moče, limit detekce pod 2 ng/mL. Kalibrační křivka v rozsahu 10–1000 ng/mL vykazuje R² > 0,999. Ionové poměry tří fragmentů (primární a dvě potvrdicí ionty) se shodují ±20 % vůči standardu a apex plyny chromatogramu spadají do ±2 skenů z retenčního času.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje:

• Legálně obhajitelné výsledky v souladu se SAMHSA.
• Vysokou propustnost vzorků díky rychlému teplotnímu programu a pre-rinsingu autosampleru.
• Aplikaci v soudní toxikologii, klinickém i rutinním QA/QC prostředí.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozvoj se soustředí na:

• Rozšíření panelu detekovaných drogových metabolitů v jedné analýze.
• Integraci automatizované extrakce a derivatizace do mikrotitračních platforem.
• Využití rychlejších kapilárních kolon a ultrarychlého GC.
• Pokročilou datovou analýzu založenou na strojovém učení pro identifikaci vzácných fragmentů.

Závěr

Popsaná metoda poskytuje vysoce citlivou, specifickou a reprodukovatelnou analýzu benzoylecgoninu v moči. Splňuje přísné federální požadavky, zaručuje krátké doby analýzy a podporuje důkazně stanovené výsledky vhodné pro forenzní i klinická pracoviště.

Reference

1. Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man, 8th Ed. Biomedical Publications, 2008.
2. Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs, Fed Reg. 73:71857 (25 Nov 2008).
3. Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs, Fed Reg. 75:22809 (30 Apr 2010).
4. Pierce Catalog. Rockford, IL.