Overcoming the challenges of nitrosamine impurities in drugs

Význam tématu

Nitrosaminy jsou vysoce karcinogenní nečistoty klasifikované jako mutagenní karcinogeny třídy 1. Problematika se stala zásadní poté, co byla v roce 2018 zjištěna kontaminace sartánových antihypertenziv NDMA a dalšími nitrosaminy. Regulace ICH M7 a požadavky FDA nyní vyžadují kontrolu stopových obsahů nitrosaminů pod 0,03 ppm v aktivních složkách i hotových lécích.

Cíle a přehled studie / článku

Článek představuje ucelené chromatograficko-hmotnostně spektrometrické řešení (GC-MS, GC-MS/MS a GC-Orbitrap) pro cGMP testování NDMA, NDEA a dalších nitrosaminů. Cílem je demonstrovat dosaženou citlivost, selektivitu, linearitu a shodu s regulačními limity při analýze API i finálních farmaceutických přípravků.

Použitá metodika a instrumentace

Pro analýzu byly využity následující techniky:

• statické headspace odběry s TriPlus 500 HS autosamplerem
• direct liquid injection s AS 1310 autosamplerem
• jednokvadrupólová GC-MS (ISQ 7000) v režimu SIM
• triple kvadrupólová GC-MS/MS (TSQ 9000) v režimu SRM
• GC-Orbitrap (Exactive GC-MS a Q Exactive GC) pro full scan a vysoké rozlišení (60 000 FWHM)
• AEI ion source a ExtractaBrite ion source
• Chromeleon CDS software pro cGMP a 21 CFR 11 compliant řízení, zpracování a archivaci dat

Hlavní výsledky a diskuse

Metody dosahují LOD 0,0002–0,0005 ppm a LOQ 0,0005–0,001 ppm, což výrazně překračuje požadavky FDA. Linearity standardů vykazuje R2 > 0,999, opakovatelnost měření RSD < 8 %. Orbitrap technologie poskytuje sub-1 ppm přesnost hmotnosti a umožňuje retrospektivní screening neznámých kontaminant.

Přínosy a praktické využití metody

Statické headspace odběry minimalizují složitost vzorku a riziko carryover. Kombinace GC-MS/MS a GC-Orbitrap nabízí vysokou selektivitu, rychlou validaci metod a splnění cGMP standardů. Kompletní workflow usnadňuje rutinní kontrolu API i excipientů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další posun v citlivosti přinese AEI ion source a využití dynamického headspace. Rozšíření full scan dat s cílenou kvantifikací umožní širší screening stopových nečistot. Technologie Orbitrap podpoří retrospektivní analýzy a identifikaci dosud neznámých kontaminant.

Závěr

Popsané metody GC-MS, GC-MS/MS a GC-Orbitrap poskytují robustní, vysoce citlivé a selektivní řešení pro analýzu nitrosaminů ve farmaceutických produktech. Flexibilita vzorkování a pokročilé iontové zdroje zabezpečují shodu s regulačními limity a připravenost na budoucí zvýšení nároků.

Reference

1. WHO Information Note Nitrosamine impurities: Update on nitrosamine impurities, 2019
2. ICH Harmonised Guideline M7(R1): Assessment and Control of DNA Reactive Mutagenic Impurities in Pharmaceuticals, 2017
3. IARC Monographs on the Evaluation of Carcinogenic Risks to Humans, volume 89
4. EMA: Temporary interim limits for NMBA, DIPNA and EIPNA impurities in sartan blood pressure medicines, 2019
5. FDA: Combined N-Nitrosodimethylamine and N-Nitrosodiethylamine Impurity Assay by GC/MS-Headspace, 2019
6. USP <467> Organic Volatile Impurities, Chemical Tests, Official December 2020