Agilent MassHunter Optimizer - Quick Start Guide

Význam tématu

Automatizace vývoje metod hmotnostní spektrometrie v režimu MRM je klíčová pro zkrácení času a zvýšení reprodukovatelnosti analýz v oblasti malých molekul i peptidů. Ruční optimalizace fragmentačního napětí, kolizní energie a výběru iontů je časově náročná a náchylná k chybám. Agilent MassHunter Optimizer přináší plně automatický pracovní postup, který tento proces výrazně urychluje a standardizuje.

Cíle a přehled článku

Cílem je představit software MassHunter Optimizer, popsat jeho hlavní funkce a pracovní postup při automatickém vyhodnocování parametrů pro triple kvadrupólový hmotnostní spektrometr. Článek ukazuje, jak provést postup od přípravy vzorku přes nastavení metody až po import optimalizačních výsledků do programu MassHunter Data Acquisition.

Použitá metodika a instrumentace

Analýza probíhá ve čtyřech fázích:

• SIM scan pro optimalizaci fragmentorového napětí.
• Produktový scan pro výběr nejintenzivnějších produktových iontů.
• MRM scan pro optimalizaci kolizní energie.
• Druhý produktový scan pro ověření a jemné doladění citlivosti.

Instrumentace:

• Agilent MassHunter Optimizer software (verze B.07.00 a vyšší).
• Triple kvadrupólový hmotnostní spektrometr Agilent řady 6400/6500.
• Způsoby vstřikování vzorku: ruční/automatická infuze a LC injekce se sloupcem.
• Mobilní fáze s gradientem 5–75 % organické složky.

Hlavní výsledky a diskuse

Implementace MassHunter Optimizer vede k výrazné časové úspoře oproti manuální optimalizaci. Softwarový algoritmus spolehlivě:

• vybírá optimální prekurzorové a produktové ionty dle předdefinovaných pravidel (M+H, M+Na, apod.),
• optimalizuje fragmentorové napětí a kolizní energii pro jednotlivé přechody,
• uchovává výsledky v databázi a umožňuje jejich opakované použití a export do akvizičního softwaru.

Diskuse ukazuje, že automatizace zvyšuje konzistenci dat a minimalizuje chyby způsobené subjektivním nastavením operátora.

Přínosy a praktické využití metody

Software poskytuje:

• rychlé vytvoření metody pro MRM i dMRM/tMRM analýzu,
• možnost hromadného importu/exportu seznamů látek z Excelu nebo databáze,
• jednoduchou integraci s Agilent MassHunter Data Acquisition pro okamžité spuštění analýz.

Prakticky se využívá v oblasti farmaceutického vývoje, environmentální analýzy, potravinářské kontroly a klinického testování.

Budoucí trendy a možnosti využití

Mezi potenciální směry dalšího rozvoje patří:

• integrace umělé inteligence pro predikci fragmentačních vzorců a kolizních energií,
• podpora ještě vyšší propustnosti a pokročilých režimů ionizace,
• rozšíření databází látek o nové třídy analytů a modifikované peptidy,
• aplikace v reálném čase s on-line zpětnou vazbou a adaptivními akvizičními režimy.

Závěr

Agilent MassHunter Optimizer představuje efektivní nástroj pro automatizovaný vývoj MRM metod. Umožňuje standardizaci, úsporu času a zvyšuje kvalitu dat ve srovnání s manuálními postupy. Díky snadné integraci s akvizičními programy se stává nepostradatelným v moderních laboratořích.

Reference

• Agilent MassHunter Optimizer Quick Start Guide, G3793-90008 Revision B, May 2016.