General Approach to the Extraction of Basic Drugs from Biological Fluids Using Non-Polar ISOLUTE® SPE Columns

Význam tématu

Komplexní odstranění matrice z biologických vzorků je klíčové pro spolehlivou kvantifikaci slabě ionizovatelných a lipofilních léčiv. Nespecifická sorpce nepolárních interferencí vede k nízké čistotě extraktu a potlačení signálu v chromatografických metodách.

Cíle a přehled studie

Cílem poznámky je popsat postup extrakce základních léků s aminoskupinou z biologických tekutin za využití netučně upravených nepolárních ISOLUTE SPE kolon. Studie demonstruje kombinaci nepolárních a iontových interakcí pro selektivní zachycení analyzovaných sloučenin a efektivní odstranění koextrahovaných interferencí.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorek biologické tekutiny se ředil fosfátovým pufrem (0,05–0,1 M, pH 5,0–7,0) v poměru 1:1. SPE kolony se kondicionovaly acetonitrilem a stejným pufrem. Aplikace vzorku probíhala při 1–2 mL/min. Následovalo vymytí nepolárních interferencí 2 mL směsi acetonitril/voda (20:80, v/v), sušení kolony a eluce analyzátů methanolem s přídavkem 0,5 % HCl nebo 1–5 % triethylaminu. Pro GC analýzu se eluát sušil a derivatizoval.

Použitá instrumentace

• ISOLUTE SPE kolony non-polar, non-endcapped (C18, MF C18, C8, C4, C2, CN)
• RENSA RP sorbent (styren-divinylbenzenová pryskyřice, 0,05–0,1 mm, povrch 400 m2/g, pH 1–14, hustota 340 mg/mL)
• Vakuová nebo tlaková SPE aparatura
• UHPLC/GC přístroje podle závěrečné analýzy

Hlavní výsledky a diskuse

Kombinace nepolárních a iontových vazeb na netučně upravených sorbentech umožnila selektivní zadržení aminosloučenin a odmytí většiny lipofilních interferencí. RENSA RP vykazoval vysokou mechanickou odolnost a reprodukovatelnost, což se odrazilo v konzistentních výtěžcích a čistotě extraktů. Doporučuje se screening různých non-endcapped sorbentů pro specifické aplikace.

Přínosy a praktické využití metody

• Vyšší čistota extraktů a nižší pozadí signálu
• Použitelnost v biofarmaceutickém vývoji, toxikologii a QA/QC
• Široké pH rozmezí a dlouhá životnost sorbentů

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj směřuje k miniaturizaci a plné automatizaci SPE formátů, vývoji modifikovaných sorbentů s cílenou selektivitou a integraci on-line SPE s UHPLC či MS pro vysokopropustné laboratoře.

Závěr

Popsaný postup demonstruje efektivní extrakci zásaditých léčiv z biologických vzorků kombinací nepolární a iontové retence na non-endcapped sorbentech. Výsledkem jsou vysoce čisté, reprodukovatelné extrakty vhodné pro moderní chromatografické analýzy.

Reference

Biotage TN112.V.1, 2020