High Sensitive and Accurate Analysis of Nitrosamines Using GC/MS/MS

Význam tématu

Analýza nitrosaminů je ve farmaceutickém průmyslu klíčová vzhledem k jejich pravděpodobnému karcinogennímu účinku. Sloučeniny jako NDMA a NDEA patří do skupiny 2A dle IARC a podle ICH M7 je nutné je v léčivých přípravcích spolehlivě detekovat a kvantifikovat.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a ověřit metodu pro simultánní stanovení pěti nitrosaminů v léčivých surovinách pomocí GC/MS/MS. Metoda měla dosáhnout vysoké citlivosti, přesnosti a reprodukovatelnosti v širokém dynamickém rozsahu.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky léčivých surovin byly extrahovány dichlormethanem, separovány centrifugací a filtrovány. Pro kalibraci byly připraveny standardy v rozmezí 0,2–200 ng/mL. GC podmínky: splitless injekce 2 µL při 250 °C, kolona SH-I-624Sil MS (30 m × 0,25 mm, 1,4 µm), program teploty 50 °C → 250 °C. MS/MS detekce v módu MRM s elektronovou ionizací.

• GCMS-TQ8050 NX (Shimadzu)
• AOC-20i+s Plus autosampler
• MRM přechody pro NDMA, NDEA, NEIPA, NDIPA, NDBA

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační křivky vykázaly koeficient korelace R ≥ 0,999 pro všechny analyty. Reprodukovatelnost standardů (%RSD) byla ≤ 8 % v celém rozsahu. Při testu maticových vlivů (spiking do extraktů pěti API) byly poměry ploch spiked/standard mezi 75 až 106 %, s %RSD ≤ 10 %. Výsledky potvrzují minimální vliv matric a vysokou přesnost metody.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje spolehlivé stanovení karcinogenních nitrosaminů v léčivých surovinách v trace úrovních. Vysoká citlivost a MRM detekce zajišťují eliminaci interferencí a konzistentní výsledky, což podporuje rutinní QA/QC v analytických laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může směřovat k automatizaci přípravy vzorků, integraci s vysokopropustnými systémy a rozšíření na LC/MS/MS pro polární a termolabilní nitrosaminy. Softwarová vylepšení a multianalyzátové platformy zvýší efektivitu a robustnost metod.

Závěr

GC/MS/MS systém GCMS-TQ8050 NX prokázal vynikající lineární odezvu, citlivost i reprodukovatelnost při stanovení nitrosaminů. Metoda splňuje požadavky ICH M7 a je vhodná pro rutinní kontrolu karcinogenních nečistot ve farmaceutických surovinách.

Reference

• International Council for Harmonisation M7 (R1), Addendum: Assessment and Control of DNA Reactive (Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals to Limit Potential Carcinogenic Risk