Sterols - Analysis of cholesterol oxidation products (COPs) as TMS derivatives

Význam tématu

Cholesterolové oxidační produkty (COPs) se tvoří v potravinách během zpracování a skladování a jsou považovány za potenciálně toxické.
Jejich spolehlivá detekce a kvantifikace je klíčová pro zabezpečení kvality potravin a ochranou zdraví spotřebitelů.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout rychlou a citlivou metodu GC-FID pro separaci a kvantifikaci širokého spektra COPs, optimalizovat podmínky pro analýzu TMS derivátů a ověřit použitelnost ve vzorcích potravin, konkrétně v prášku z žloutků.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda využívá derivatizaci COPs trimethylsilylovými činidly a následnou kapilární GC-FID analýzu na kolonce Agilent CP-Sil 5 CB Low Bleed/MS (0,25 mm × 25 m, df = 0,12 μm).
Teplotní program:

• 245 °C → 265 °C při 3,5 °C/min
• 265 °C → 310 °C při 0,5 °C/min

Carrier gas helium (0,80 bar), injector split (100 mL/min, 325 °C), detektor FID (325 °C). Vzorky v hexanu (0,1–0,5 mg/mL), objem 1 μL.
Pro odstranění interferencí byla před analýzou provedena frakcionace využitím SPE.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila separaci 18 COPs v průběhu 20 minut s vynikajícím rozlišením nejběžnějších oxysterolů.
Důležitost správné SPE frakcionace byla potvrzena pro přesnou kvantifikaci, jelikož minimalizuje matrixové efekty.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá rutina pro kontrolu kvality potravin a výzkum oxidačních procesů.
• Možnost sledování stability lipidů a stanovení škodlivých produktů na potravinářském i průmyslovém pracovišti.
• Vysoká reprodukovatelnost a citlivost pro rutinní analýzy.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro zlepšení selektivity a nižší meze detekce.
• Automatizace derivatizace a SPE pro vyšší propustnost laboratorních kapacit.
• Využití LC-MS/MS jako alternativní techniky pro tepelně citlivé analyty.

Závěr

Prezentovaná GC-FID metoda s TMS derivatizací a optimalizovaným teplotním programem poskytuje robustní a efektivní nástroj pro analýzu COPs v potravinářských matricích.

Reference

Agilent Technologies, Inc. A01523, Application Note, 31 October 2011