Extraction of THC-COOH from Urine Using ISOLUTE® HAX Columns

Význam tématu

Extrahování THC-COOH, hlavního karboxylového metabolitu tetrahydrocannabinolu, z moči je zásadní pro toxikologická vyšetření v klinické, forenzní i pracovněprávní praxi. Spolehlivá izolace a očištění analytu umožňuje přesné stanovení stopových koncentrací a podporuje rozhodování ve zdravotnictví a právní oblasti.

Cíle a přehled studie

Studie se zaměřila na vývoj rychlé a robustní metody pevné fáze SPE s kombinovaným nepolárním a aniontovým mechanismem (ISOLUTE HAX), která garantuje minimálně 75 % výtěžnost THC-COOH z močového matrixu. Důraz byl kladen na efektivní odstranění interferencí a reprodukovatelnost výsledků při vysoké iontové síle vzorku.

Použitá metodika a instrumentace

Předúprava vzorku a SPE:

• Přidání interního standardu do 3 mL moči
• Alkalická hydrolýza (10 M NaOH, 60 °C, 15 min), ochlazení a acidifikace 0,5 mL kyseliny octové
• Kondicionace SPE kolony: 1 mL metanolu (2 mL/min), equilibrace 1 mL vody (2 mL/min)
• Naložení vzorku: průtok 2 mL/min
• Odeprání interferencí: 0,3 M amonný acetát pH 8 (1 mL), 20 mM amonný acetát (1 mL), 1 mL metanolu
• Eluce THC-COOH: 1 mL metanol/ethylacetát/ocetná kyselina (48:50:2) při 1 mL/min

Instrumentace:

• GC-MS s kapilární kolonnou DB-5 (15 m × 0,25 mm × 0,25 µm)
• Program teploty: 180 °C (1 min), nárůst 20 °C/min do 280 °C (1 min)
• Detekce pomocí hmotnostního spektrometru

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje průměrné výtěžnosti analytu nad 75 % i v matrici s vysokou iontovou silou. Kombinované retence non-polární a aniontové uspořádání efektivně odstraňuje interferující látky, přičemž extrakt vykazuje vysokou čistotu a konzistentní reproducibilitu vhodnou pro následnou derivatizaci a analýzu GC-MS.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a reprodukovatelná příprava vzorků pro toxikologické laboratoře
• Efektivní snížení interferencí z komplexního matrixu moči
• Vysoká citlivost a selektivita pro screening drog
• Vhodné pro forenzní, klinické a pracovní sledování expozice

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze dále rozšířit o plně automatizované SPE systémy a miniaturizované formáty kolony. Perspektivní je adaptace na LC-MS/MS analýzu bez derivatizace a aplikace na jiné biologické matrice (plazma, sérum, vlasy).

Závěr

Navržená SPE procedura s ISOLUTE HAX kolonkami představuje spolehlivý a robustní postup pro extrakci THC-COOH z moči. Díky vysoké výtěžnosti a účinnému odstranění interferencí je metoda vhodná pro rutinní toxikologické aplikace v různých laboratorních prostředích.