Column Selection for the Analysis of Fatty Acid Methyl Esters

Význam tématu

Analýza methylesterů mastných kyselin (FAME) je klíčovou metodou pro charakterizaci lipidové složky potravin z hlediska kvality, původu a zdravotních vlastností. Umožňuje rozlišit nasycené, mono- a polynenasycené kyseliny, včetně cis/trans izomerie, a je zásadní pro kontrolu mléčného tuku, rostlinných a rybích olejů.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo porovnat tři typy kapilárních GC kolon s odlišnou polaritou: DB-Wax (polyethylen-glykol), DB-23 (středně polární cyanopropyl) a HP-88 (vysoce polární cyanopropyl), a zhodnotit jejich schopnost separovat FAME podle počtu uhlíků, stupně nasycení a geometrické izomerie.

Použitá metodika

Dermativizace: vzorky tuků se saponifikují KOH v methanolu a získané mastné kyseliny se methylují. Výsledné FAME se extrahují hexanem a ředí na 0,01–0,1 % ve vzorku.

Použitá instrumentace

• Chromatograf Agilent 6890 GC s FID (nebo MS detektorem Agilent 5973).
• Autosampler Agilent 7683 a split/splitless inlet s rozdělovacím poměrem 1:50.
• Kolony: DB-Wax 30 m×0,25 mm×0,25 µm; DB-23 60 m×0,25 mm×0,15 µm; HP-88 100 m×0,25 mm×0,2 µm (také 60 m pro QC olivového oleje).
• Použité nosné plyny: vodík (DB-Wax, HP-88) nebo helium (DB-23, HP-88).
• Oven programy optimalizované pro rychlost a rozlišení v rozmezí 50–230 °C.

Hlavní výsledky a diskuse

• DB-Wax: Výborné rozlišení jednoduchých olejů a mléčného tuku, identifikace butyrové kyseliny, ale nedostatečná cis/trans separace.
• DB-23: Dobrý kompromis pro komplexní směsi včetně rybího oleje, jasná detekce EPA a DHA, částečné rozlišení cis/trans izomerů.
• HP-88: Nejvyšší polarita umožňuje detailní rozlišení geometrických izomerů (cis-/trans, polohy dvojných vazeb), vhodné pro QC olivového oleje podle EC 2568/91 i kontroly hydrogenovaných tuků.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá identifikace a kvantifikace mastných kyselin v potravinářském průmyslu.
• Stanovení zdravotně významných omega-3 kyselin a sledování transmastných kyselin v hydrogenovaných tucích.
• Podpora regulačních požadavků na kvalitu mléčných produktů a olivového oleje.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj bude směřovat ke specializovaným stacionárním fázím pro lepší rozlišení izomerů, nasazení dvourozměrné GC (GC×GC) a hyphenovaných technik (GC-MS/MS) pro vyšší selektivitu a citlivost, včetně online monitoringu ve výrobních linkách.

Závěr

Volba kolony závisí na složitosti vzorku a požadovaném rozlišení: DB-Wax pro základní analýzy jednoduchých tuků, DB-23 pro komplexní směsi a omega-3 mastné kyseliny, HP-88 pro detailní cis/trans analýzu a QC olivového oleje. Použité metody zajišťují spolehlivé a reprodukovatelné výsledky v souladu s mezinárodními standardy.

Reference

1. Christie W.W. Gas Chromatography and Lipids, A Practical Guide, The Oily Press, 1989.
2. AOAC Official Methods of Analysis, Ce 2–66, 2000.
3. IUPAC Standard Methods for Analysis of Oils, Fats and Derivatives.
4. ISO 15304:2002 – Analysis of FAME.
5. EU Regulation No 2568/91, Official Journal L248.
6. EC BCR Certified Reference Material 164 – Milk Fat.