A NOVEL SORBENT FOR PASS-THROUGH SPE CLEANUP: A SIMPLE, QUICK, AND EFFECTIVE ALTERNATIVE FOR REMOVAL OF LIPIDS AND CHLOROPHYLL FROM QUECHERS EXTRACTS

Význam tématu

V oblasti potravinářských a environmentálních laboratoří je klíčové účinně odstraňovat z extraktů rušivé látky, jako jsou tuky, fosfolipidy a chlorofyl, které mohou interferovat s chromatografickými a hmotnostními analýzami pesticidénních reziduí. Moderní metody, jako QuEChERS, zrychlují přípravu vzorků, nicméně zanechávají významné množství souběžně extrahovaných matriálních komponent. Vývoj jednoduchých, rychlých a reprodukovatelných sorpčních metod pro čištění vzorků je proto zásadní pro zvýšení citlivosti a spolehlivosti následné analýzy.

Cíle a přehled studie

Studie hodnotí nový reverzněfázový sorbent Oasis PRiME HLB pro pasážové SPE čištění extraktů z QuEChERS extrakcí avokáda a špenátu. Cílem bylo porovnat jeho účinnost s běžným dSPE využívajícím grafitovaný uhlík (GCB) a C18/PSA směsi. Odstraňování tuků, fosfolipidů a chlorofylu bylo monitorováno kombinací UPLC-MS/MS, APGC-MS/MS, UPLC-PDA a GC-MS analýz.

Použitá instrumentace

• UPLC-MS/MS: Waters ACQUITY UPLC I-Class, kolona BEH C18 (1,7 µm, 100 × 2,1 mm), mobilní fáze A: NH₄OAc 10 mM ve vodě (pH 5), B: NH₄OAc 10 mM v methanolu (99:1); teplota 45 °C; detekce Xevo TQ-S micro (ESI+, MRM).
• APGC-MS/MS: GC Agilent 7890, kolona Restek Rxi-5ms (30 m × 0,25 mm × 0,25 µm), přímé APGC ionizace, detekce Xevo TQ-S (API+, MRM).
• UPLC-PDA: ACQUITY I-Class FTN, Cortecs UPLC T3 (2,1 × 100 mm), detektor PDA při 450 nm.
• GC-MS: Agilent 7890 s EI ionizací, standardní teplotní program, analýza metylesterů tuků.

Použitá metodika

Vzorky avokáda (5 g) a špenátu (15 g) byly homogenizovány a extrahovány směsí 1 % octové kyseliny v acetonitrilu (15 mL). Po přidání QuEChERS pufru a odstředění byly supernatanty čištěny dvěma způsoby:

• dSPE: 150 mg Na₂SO₄, 50 mg C18, 50 mg PSA, 10–50 mg GCB na mL extraktu, 1 min ruční míchání, odstředění.
• Pasážové SPE: Oasis PRiME HLB 150 mg (3 cc), bez kondicionace, 0,8 mL extraktu pana do odpadu a 1,5 mL sběrné frakce.

Hlavní výsledky a diskuse

• Oasis PRiME HLB odstranil z extraktu avokáda >95 % fosfolipidů, >95 % chlorofylu a >80 % tuků.
• U špenátu dosáhl >99 % odstranění chlorofylu a >95 % luteinu, zatímco dSPE s 10 mg GCB nedostatečně odstranilo pigmenty.
• dSPE s 50 mg GCB účinně čistilo pigmenty, avšak způsobilo významné ztráty některých planar­ních pesticidénních látek (>20 % ztráty u folpetu a captanu).
• Pasážové SPE s Oasis PRiME HLB nevykazovalo ztráty u planar­ních pesticidů, zachovalo vysokou návratnost (>90 %) a výrazně zlepšilo kvalitu chromatogramů u UPLC-MS/MS i APGC-MS/MS.

Přínosy a praktické využití metody

Oasis PRiME HLB pasážová SPE nabízí jednoduchý a plně reprodukovatelný postup bez potřeby kondicionace sorbentu. Variabilita cartridge formátů („vac“ i „plus“) umožňuje plnou integraci do vakuových/manifoldu aplikací. Metoda urychluje workflow a zlepšuje spolehlivost rutinních analýz pesticidních reziduí v matricích bohatých na lipidy a pigmenty.

Budoucí trendy a možnosti využití

Dalším krokem je rozšíření použití sorbentu do dalších komplexních matric (masné produkty, ořechy, listová zelenina), automatizace pasážového SPE v robotech a kombinace s novými sorbenty pro cílené odstranění dalších interferentů. Integrace do on-line systémů čištění vzorků a rozvoj rychlých screeningových metod přispěje k dalšímu zvyšování produktivity laboratoří.

Závěr

Oasis PRiME HLB sorbent se osvědčil jako efektivní alternativa k tradičním dSPE krokům pro čištění QuEChERS extraktů. Umožňuje rychlé odstranění tuků, fosfolipidů a chlorofylu bez ztráty klíčových pesticidních látek a zvyšuje kvalitu a spolehlivost následné chromatografické a hmotnostní analýzy.