Tříventilový <a href="https://gcms.cz/products/5">GC systém Agilent 8860</a> představuje výkonný a zároveň nízkonákladový instrument pro analýzy permanentních plynů a lehkých uhlovodíků. Elektronická kontrola tlaku <a href="https://gcms.cz/products?category=1&amp;manufacturerItems=10&amp;search=8890%208860&amp;distributorItems=37">poslední generace GC 88xx</a> zajišťuje laboratoři jednoduchou obsluhu a excelentní opakovatelnost analýz jak z hlediska retenčních časů analytů, tak co se týká ploch píků daných koncentrací.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Obr_1_GC_system_Agilent_8860_07b25c66fe/Obr.-1.-GC-system-Agilent-8860.jpg" alt="Obr. 1. GC systém Agilent 8860"/>
Lámete si hlavu s analýzou složení plynné směsi a pracujete s omezeným rozpočtem? Plynová chromatografie od výrobce Agilent pro tyto situace nabízí řešení. GC 8860 s konfigurací 3 ventilů, plamenově ionizačním detektorem (FID) a tepelně vodivostním detektorem (TCD), sestavený pro separace směsí permanentních plynů a lehkých uhlovodíků je pravděpodobně určený právě Vám.
Kanál zakončený TCD detektorem je věnován separaci nejčastěji se vyskytujících permanentních plynů H₂, CO₂, O₂, N₂, CH₄ a CO. Kapilární kolona (<a href="https://gcms.cz/library?search=al2o3&amp;mainauthorItems=10">Al₂O₃ PLOT</a>: 50 m × 0.53 mm) a FID detektor slouží k separaci všech lehkých uhlovodíků (C₁-C₆) včetně methanu (CH₄).
<h3>Úvod</h3>
Analýza směsí permanentních plynů a lehkých uhlovodíků je aplikována v mnoha laboratořích petrochemického, chemického a energetického průmyslu. Permanentní plyny, jako jsou O₂, N₂, CH₄, CO a CO₂, bývají hlavními cílovými analyty těchto aplikací. Koncentrace jednotlivých složek jsou pak pochopitelně středem zájmu zmíněných laboratoří. Tříventilový GC systém Agilent 8860 je jednoduchou, a přitom výkonnou platformou pro řešení všech aplikací podobného charakteru.
<h3>Experimentální část</h3>
V našem GC systému figurují tři ventily.
Šestiportový dávkovací
<ul>
<li>Desetiportový dávkovací s možností zpětného toku ven ze systému</li>
<li>Šestiportový ventil pro izolaci kolony</li>
</ul>
Ventilový diagram a zapojení kolon si můžete prohlédnout na obrázku 2. Dávkovací smyčky jsou zapojeny v sérii pro umožnění simultánního dávkování do obou kanálů najednou. Ovládání ventilů je umožněno chromatografickým <a href="https://gcms.cz/products/24">SW OpenLab CDS Workstation</a>. Separační podmínky a časování přepínání ventilů jsou uvedeny v tabulkách 1 a 2. V případě této aplikace byl použit standard směsi permanentních plynů o stálém složení. Jeho složky a jejich koncentrace jsou uvedeny v tabulce 3.
<h5>Tab. 1 Chromatografické podmínky</h5>
<ul>
<li>Velikost dávkovací smyčky: 0,25 ml</li>
<li>Průtok FID kanálem: 5 ml/min</li>
<li>Teplota FID: 300 °C</li>
<li>Nosný plyn FID kanálu: N₂</li>
<li>Teplota CFT splittru: 200 ° C</li>
<li>Splittovací poměr: 25: 1</li>
<li>Průtok TCD kanálem: 30 ml/min</li>
<li>Teplota TCD: 250 °C</li>
<li>Nosný plyn TCD kanálu: He</li>
<li>Teplota ventilového boxu: 120 °C</li>
<li>Program pece: 45 °C (6 min)&gt; 180 °C (2,25 min) při 20 °C/min</li>
</ul>
<h5>Tab. 2 Časování přepínání ventilů</h5>
<ul>
<li>Ventil 1 ON: 0,01 min</li>
<li>TCD Negativní polarita ON: 0,6 min</li>
<li>TCD Negativní polarita OFF: 1.4 min</li>
<li>Ventil 2 ON: 1.7 min</li>
<li>Ventil 1 OFF: 2.5 min</li>
<li>Ventil 2 OFF: 3.2 min</li>
</ul>
Časování ventilu 3 je stejné jako ventil 1.
<h5>Tab. 3. Koncetrace standardu směsi permanentních plynů o stálém složení</h5>
<ul>
<li>H₂: 6.09 %</li>
<li>O₂: 3.00 %</li>
<li>N₂: 9.97 %</li>
<li>CO: 1.99 %</li>
<li>CO₂: 3.48 %</li>
<li>CH₄: 71.92 %</li>
<li>C₂H₆: 2.00 %</li>
<li>C₃H₈: 0.99 %</li>
<li>iC₄: 0.11 %</li>
<li>nC₄: 0.10 %</li>
<li>iC₅: 0.12 %</li>
<li>nC₅: 0.12 %</li>
<li>nC₆: 0.11 %</li>
</ul>
<h3>Diagram</h3>
Na obrázku 2 můžete vidět, jak plynný vzorek vstupuje do šesticestného dávkovacího ventilu a díky sériovému propojení obou dávkovacích ventilů je tak plněn do obou smyček současně. V momentě přepnutí dávkovacích ventilů dochází k simultánní separaci na obou kanálech.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Obr_2_Ventilovy_diagram_a_zapojeni_kolon_dcf3dc1f46/Obr.-2.-Ventilovy-diagram-a-zapojeni-kolon.png" alt="Obr. 2. Ventilový diagram a zapojení GC kolon a celého chromatografického systému"/>
Na FID kanálu prochází vzorek přes S/SL inlet, na němž lze splitovat celkový objem u koncentrovaných vzorků pro optimalizaci rozlišení metody. Následně prochází směs přes PLOT kolonu, kde je separována do FID detektoru.
Na TCD kanálu prochází směs nejprve přes <a href="https://gcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=porapak%20q">Porapak Q</a> předkolonu, kde jsou odděleny vyšší uhlovodíky, které jsou následně po přepnutí toku odstraněny ze systému. Zbylé permanentní plyny prochází přes druhou Porapak Q kolonu, kde jsou dále separovány především CO₂ a nižší uhlovodíky. Tyto složky se zde zdrží, zatímco ostatní (H₂, O₂, N₂, CH₄ a CO) prochází k separaci na třetí kolonu <a href="https://gcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=Molsieve%205A">Molsieve 5A</a>. Tato kolona je tak izolována před vstupem CO₂, který by se zde zachytil a nepostupoval dále. Na TCD detektor tudíž následně první prochází CO₂ a nižší uhlovodíky z Porapak Q kolony a poté ostatní permanentní plyny z Molsieve 5A kolony.
<h3>Výsledky</h3>
Chromatogramy pro oba kanály (FID, TCD) jsou znázorněny na obrázcích 3 a 4. Uhlovodíky C₁ až C₆ jsou separovány kolonou PLOT Al₂O₃ do 15 minut. U vzorků zemního plynu, které obsahují uhlovodíky vyšší než C₆, mohou být konečné teploty gradientu pece nastaveny až na 220 °C, což dostačuje pro eluci uhlovodíků až do délky řetězce C₁₁.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Obr_3_Chromatogram_pro_FID_kanal_8861f2eba9/Obr.-3.-Chromatogram-pro-FID-kanal.png" alt="Obr. 3. Chromatogram pro FID kanál. Separace: CH₄, C₂H₆, C₃H₈,iC₄, nC₄, iC₅, nC₅ a C₆"/>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Obr_4_Chromatogram_pro_TCD_kanal_bfde6ca86f/Obr.-4.-Chromatogram-pro-TCD-kanal.png" alt="Obr. 4. Chromatogram pro TCD kanál. Separace: H₂, O₂, CO₂, N₂, CH₄ a CO"/>
<h3>Linearita</h3>
Standard plynné směsi byl za účelem kalibrace dynamicky ředěn do pěti stupňů. Výsledky pro linearitu měření u všech složek směsi jsou uvedeny v tabulce 4.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Tab_4_Vysledky_pro_linearitu_mereni_0c5953045a/Tab.-4.-Vysledky-pro-linearitu-mereni.png" alt="Tab. 4. Výsledky pro linearitu měření"/>
<h3>Opakovatelnost</h3>
Při uplatnění splitování objemu vzorku během nástřiku na FID kanál byly relativní směrodatné odchylky (RSD) pro všechny uhlovodíkové složky směsi nižší než 0.8 %. Této opakovatelnosti systém dosahuje díky kompletní elektronické kontrole tlaku od injektoru po detektor. Opakovatelnost pro ostatní plyny (tab. 5) na TCD kanálu taktéž dosahuje skvělých hodnot. Koncentrace jednotlivých složek byly 0.305 % pro H2, 0.174 % pro CO2, 0.15 % pro O2, 0.5 % pro N2, 3.596 % pro CH4, a 0.1 % pro CO.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Tab_5_Opakovatelnost_pro_ostatni_plyny_na_TCD_kanalu_012b8d64d6/Tab.-5.-Opakovatelnost-pro-ostatni-plyny-na-TCD-kanalu.png" alt="Tab. 5. Opakovatelnost pro ostatní plyny na TCD kanálu"/>
<h3>Nízké koncentrace permanentních plynů</h3>
Pro nízké koncentrace byla testována ještě další standardní plynná směs. Záměrem bylo zhodnocení citlivosti a opakovatelnosti pro tyto nižší koncentrace. Obrázek 5 ukazuje chromatogram směsi permanentních plynů v tomto složení. Obrázek 6 pak vykresluje překryv záznamů pěti různých analýz téhož vzorku. Chromatografické podmínky a koncentrace všech složek jsou uvedeny níže (tab. 6) 
<h5>Tab. 6. Chromatografické podmínky a koncentrace všech složek</h5>
<ul>
<li>Nosný plyn: He</li>
<li>Objem smyčky: 1ml</li>
<li>Teplotní gradient pece: 45 °C (6 min) &gt; 180 °C (2.25 min) při 20 °C/min</li>
<li>Teplota TCD: 250 °C</li>
<li>Koncetrace CO₂: 200 ppm</li>
<li>Koncetrace O₂: 176 ppm</li>
<li>Koncetrace N₂: Doplňující plyn</li>
<li>Koncetrace CH₄: 810 ppm</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Obr_5_Chromatogram_smesi_permanentnich_plynu_8f66ae637d/Obr.-5.-Chromatogram-smesi-permanentnich-plynu.png" alt="Obr. 5. Chromatogram směsi permanentních plynů"/>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Obr_6_Prekryv_zaznamu_peti_ruznych_analyz_51a4df135b/Obr.-6.-Prekryv-zaznamu-peti-ruznych-analyz.png" alt="Obr. 6. Překryv záznamů pěti různých analýz"/>

Analýza permanentních plynů a lehkých uhlovodíků v podání ventilového plynového chromatografu Agilent 8860

Identifikace bakterií v rutinních laboratořích je založena na několika přístupech. Nejrychlejší jsou metody přímé mikroskopické, které však jenom zřídka umožní přesnou identifikaci. Časově náročnější, i když průkaznější, jsou metody kultivační, spojené s biochemickou nebo sérologickou identifikací. Od přelomu tisíciletí se uplatňují také metodiky molekulární biologie, založené na rychlých PCR technikách, nebo chemotaxonomické, identifikující bakterie na základě celobuněčných proteinů nebo spektra mastných kyselin (MK). Oba poslední přístupy (molekulární i chemotaxonomické) jsou časově nenáročné, finančně dostupné a poskytují spolehlivou identifikaci běžně se vyskytujících bakteriálních druhů.
Identifikace bakterií s pomocí <a href="https://gcms.cz/article/854">plynové chromatografie</a> <a href="https://gcms.cz/products/217">Agilent 7890B</a> je založená na analýze spektra MK s využitím identifikačního systému <a href="https://gcms.cz/library?search=midi+sherlock+MIS&amp;mainauthorItems=29">MIDI Sherlock® MIS</a> (1). Doposud bylo popsáno více než 300 různých typů MK vyskytujících se v bakteriálních buňkách v různých kombinacích, rozdílných druh od druhu (1,2). Identifikační systém Sherlock obsahuje několik databází obsahující profily MK více než 1500 bakteriálních druhů a také cca 200 druhů kvasinek (1). Samotná identifikace je pak založena na porovnání spektra MK neznámého vzorku s profily MK (známých druhů) v určité databázi a následným vyhodnocením míry podobnosti spekter MK mezi vzorkem a profily v databázi. 
Pro zajištění správné identifikace je nezbytné standardizovat celý postup přípravy vzorků pro plynovou chromatografii a přísně dodržovat stanovené podmínky. Samotná analýza plynovou chromatografií je pak plně automatizovaná a nevyžaduje žádné optimalizace nebo zásahy zvenčí.
Klíčovým krokem v přípravě vzorků je samotná kultivace. Profil MK se v průběhu životního cyklu bakterií mění a nejvyšší stabilitu vykazuje v logaritmické (exponenciální) fázi růstu (1). Je tedy nezbytné připravovat extrakty pro plynovou chromatografii z biomasy aktivně a rychle rostoucích buněk. Profil MK je dále také závislý na kultivačních podmínkách, zejména teplotě a složení média (3,4). Pro zajištění správné identifikace je tedy nutné dodržovat všechny stanovené podmínky kultivace a to čas, teplotu a složení média. Tyto podmínky jsou charakterizovány pro každou databázi systému Sherlock, se kterou je porovnáván neznámý vzorek, environmentální nebo klinický.
Samotná příprava vzorku vychází z cca 20 mg připravené biomasy, která se nejdříve saponifikuje, což uvolní řetězce MK z molekul membránových fosfolipidů. Následně jsou MK metylovány za vzniku metylesterů a extrahovány do organické fáze tvořené hexanem. Připravený extrakt se pročišťuje alkalickým roztokem, což snižuje možnost kontaminace lineru, chromatografické kolony nebo detektoru zbytky buněk a reagencií (2).
Analýza plynovou chromatografií Agilent 7890B vyžaduje převedení vzorků do plynné fáze a smíchání s nosným plynem, k čemuž slouží liner. Při přechodu kolonou jsou přitom jednotlivé MK ve vzorku rozlišeny mobilitou v koloně, která se liší v závislosti na počtu atomů uhlíku, dvojných vazeb a stechiometrii. Sherlock systém vyžaduje jako nosný plyn vodík a výsledná detekce je založena na ionizaci MK ve vodíko-vzduchovém plamenu detektoru (FID).
Výsledkem identifikace je zpráva obsahující popisy jednotlivých vzorků včetně data analýzy, tabulky detekovaných MK a jejich identifikace, procentuálního zastoupení, retenčních časů a eventuálních komentářů k odchylkám (Obrázek 1). Součástí identifikačního výstupu je dále chromatogram – tedy záznam z chromatografu znázorňující jednotlivé analyty (jednotlivé typy MK) ve formě píků spolu s retenčními časy.
Samotná identifikace je uvedena v identifikačním výstupu jako tzv. shoda (Match). Tato shoda udává identifikaci do druhu spolu s tzv. indexem podobnosti (Similarity Index - SI). Pro identifikaci bakterií je nutné sledovat nejen druhovou identifikaci, ale také index podobnosti, který by se měl pro spolehlivou druhovou identifikaci pohybovat nad hodnotou 0.500 (Obrázek 1). Systém Sherlock někdy poskytuje i identifikaci tzv. druhé a další volby – obvykle příbuzné druhy (nebo rody) k prvnímu navrhovanému taxonu (Obrázek 2). V takovém případě je nutno sledovat rozdíl hodnot SI mezi jednotlivými taxony.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Obrazek_1_Identifikacni_vystup_systemu_Sherlock_na_zaklade_plynove_chromatografie_metylesteru_MK_9648e6882b/HPST-Obrazek-1-Identifikacni-vystup-systemu-Sherlock-na-zaklade-plynove-chromatografie-metylesteru-MK..jpg" alt="HPST - Obrázek 1 - Identifikační výstup systému Sherlock na základě plynové chromatografie metylesterů MK. Tabulka obsahuje jednotlivé MK s retenčními časy (RT) a procentuálním zastoupení ve vzorku. Chromatografický záznam znázorňuje průběh analýzy daného vzorku, jednotlivé detekované MK, jejich RT a také množství (plocha píků). RT - retenční čas; Response – množství MK; Ar/Ht – poměr plochy a výšky píků; RFact – faktor odezvy; ECL – ekvivalentní délka řetězce; Peak Name – identifikovaná MK; Percent - % zastoupení dané MK ve vzorku; Comment1,2 – komentáře software"/>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Obrazek_2_Identifikacni_vystup_systemu_Sherlock_poskytujici_vice_moznych_identifikaci_1decb5db51/HPST-Obrazek-2-Identifikacni-vystup-systemu-Sherlock-poskytujici-vice-moznych-identifikaci..jpg" alt="HPST: Obrázek 2 - Identifikační výstup systému Sherlock poskytující více možných identifikací. Vzhledem k vysokému SI Citrobacter freundii a rozdílu první a druhé nabízené identifikace (0,164) je možné považovat identifikaci kmene jako C.freundii za spolehlivou."/>
Pokud je SI první volby hodnota nad 0,500 a zároveň rozdíl mezi touto hodnotou a další volbou 0,100 a více, jedná se o spolehlivou druhovou identifikaci (5). Pokud se hodnota SI prvního taxonu pohybuje v rozmezí 0,300 – 0,500 ale rozdíl od druhé nabídnuté identifikace je větší než 0,100, jedná se o dobrou identifikaci a pravděpodobně atypický kmen. Hodnoty pod 0,300 jsou pro uzavření identifikace nedostačující a obvykle znamenají, že daný druh není v databázi, systém Sherlock přesto nabídne nejbližší příbuzné druhy. Nespornou výhodou, kterou tento systém nabízí, je nejen rutinní identifikace bakteriálních izolátů, ale také možnost tvoření vlastních databází nebo shlukovaní izolátů do dendrogramů (Obrázek 3), histogramů, či 2D diagramů (Obrázek 4) na základě specifických parametrů. Nadstavbové součásti systému umožňují také sledovaní a vyhledávaní shodných kmenů mezi izoláty, což může být využitelné zejména z epidemiologického hlediska.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Obrazek_3_Dendrogram_podobnosti_izolatu_sestaveny_systemem_Sherlock_na_zaklade_profilu_MK_po_analyze_plynovou_chromatografii_ea29ebc04b/HPST-Obrazek-3-Dendrogram-podobnosti-izolatu-sestaveny-systemem-Sherlock-na-zaklade-profilu-MK-po-analyze-plynovou-chromatografii..jpg" alt="HPST: Obrázek 3 - Dendrogram podobnosti izolátů sestavený systémem Sherlock na základě profilu MK po analýze plynovou chromatografií."/>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Obrazek_4_Diagram_rozlozeni_MK_C_16_0_a_Summed_Feature_8_C18_1_O7c_a_nebo_C18_1_O6c_u_6_ruznych_bakterialnich_izolatu_z_Antarktidy_8f7a35b655/HPST-Obrazek-4-Diagram-rozlozeni-MK-C(16-0)-a-Summed-Feature-8-(C18-1-W7c-a-nebo-C18-1-W6c)-u-6-ruznych-bakterialnich-izolatu-z-Antarktidy.jpg" alt="HPST: Obrázek 4 - Diagram rozložení MK C(16:0) a Summed Feature 8 (C18:1 Ω7c a/nebo C18:1 Ω6c) u 6 různých bakteriálních izolátů z Antarktidy"/>
Závěrem lze říct, že mikrobiologické využití plynové chromatografie Agilent 7890B v kombinaci s identifikačním systémem Sherlock je velice různorodé. Na jedné straně je možná rychlá a spolehlivá identifikace neznámých bakteriálních izolátů, což má význam především pro rutinní laboratoře. Na straně druhé je možné využít tuto analýzu ve výzkumu nebo epidemiologii vzhledem k možnostem, které nabízí samotný identifikační program.

Identifikace bakterií plynovou chromatografií Agilent 7890B

Oxid uhličitý (CO₂), metan (CH₄) a oxid dusný (N₂O) jsou považovány za hlavní skleníkové plyny atmosféry Země. Označení „skleníkové“ pramení z povahy jejich fyzikálního působení v atmosféře. Tyto plyny pohlcují odražené sluneční záření a teplo, které se z povrchu země zvedají zpět do vesmíru a tuto energii následně uvolňují zpět do atmosféry. Zvýšená koncentrace skleníkových plynů tímto jevem brání přirozenému ochlazování atmosféry a přispívá k ohřívání planety. Sledování objemu těchto plynů v atmosféře je proto klíčovým zdrojem informace o působení člověka na změnu klimatu a pravidelným impulsem pro aktuální změny v boji proti globálnímu oteplování.
<a href="https://hpst.cz/analyticka-chemie/plynova-chromatografie">Plynové chromatografy Agilent</a> mohou posloužit jako vhodné instrumenty pro kvantifikaci skleníkových plynů v atmosféře. V následujících řádcích popíšeme jednu z ventilových konfigurací GC systémů <a href="https://hpst.cz/plynova-chromatografie/plynove-chromatografy/gc-agilent-8890">Agilent 8890</a>, která zajišťuje kýžený analytický výstup. Tato sestava byla vyvinuta předně pro analýzu skleníkových plynů, ale lze ji uplatnit i pro studie složení půdních plynů, nebo studie plynných směsí vyskytujících se v procesu dýchání rostlin.
<h3>Konfigurace GC:</h3>
Systém se skládá z jediného kanálu zakončeného dvěma detektory, <a href="https://gcms.cz/article/287">plamenoionizačním (FID) a detektorem elektronového záchytu (ECD)</a>. Cílovými analyty jsou CO₂, CH₄, N₂O, a SF₆ ve vzorcích vzduchu. Pakliže je před FID detektorem instalován <a href="https://gcms.cz/articles?search=metanizer">metanizér</a>, lze po redukci na CH₄ analyzovat i nízké koncentrace CO₂.
<blockquote>
<ul>
<li>LabRulez: <a href="https://gcms.cz/products?category=1&amp;distributorItems=37&amp;manufacturerItems=10">Plynové chromatografy od Agilent Technologies a HPST</a></li>
<li>LabRulez: <a href="https://gcms.cz/products/1">Agilent 8890 GC System</a></li>
</ul>
</blockquote>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Obrazek_1_Ventilovy_diagram_Tabulka_1_Parametry_metody_1080ae389d/HPST-Obrazek-1-Ventilovy-diagram-Tabulka-1-Parametry-metody.webp" alt="HPST: Obrázek 1: Ventilový diagram; Tabulka 1 - Parametry metody"/>
V cestě vzorku jsou tři ventily, dva detektory a náplňové kolony o průměru 1/8 palce (HayeSep Q 80/100). Metanizér a FID detektor zajišťují měření nízkých koncentrací CH₄ a CO₂, zatímco ECD detekuje N₂O.
Ventilový diagram můžete vidět na Obrázku 1. Systém lze upravit zařazením 6-cestného ventilu pro klasické dávkování, nebo 10-cestného ventilu pro automatický headspace nástřik. Typické parametry metody znázorňuje Tabulka 1.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Obrazek_2_Chromatogram_standardu_e87ecb65d2/HPST-Obrazek-2-Chromatogram-standardu.webp" alt="HPST: Obrázek 2: Chromatogram standardu"/>
Obrázek 2 znázorňuje chromatogram vzorku standardu. Vzorek byl dávkován na krátkou HayeSep Q kolonu (COL 1), která odděluje smíšený pík pro vzduch, CO₂ a CH₄ od vodní páry. Všechny komponenty s vyšším retenčním časem než N₂O jsou zpětně odvětrány ze systému vývodem 1 (vent #1). Vzduch je následně odkloněn mimo metanizér a ECD detektor a odvětrán vývodem 2 (vent #2). CO₂ je metanizérem zredukován na CH₄ a následně změřen na FID detektoru. Po výstupu CO₂ z kolony 2 je vzorek naveden do ECD k detekci N₂O.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Tabulka_2_Studie_opakovatelnosti_na_21_vzorcich_941766347a/HPST-Tabulka-2-Studie-opakovatelnosti-na-21-vzorcich.webp" alt="HPST: Tabulka 2: Studie opakovatelnosti na 21 vzorcích"/>
V rámci vývoje metody byla provedena i studie opakovatelnosti, která posuzovala výsledky 21 po sobě jdoucích analýz. Výsledky této studie ukazuje tabulka 2. Testovaná GC konfigurace zajistila výtečnou opakovatelnost ploch píků standardu složek CH₄, CO₂ a N₂O.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Obrazek_3_Chromatogram_S_N_pro_32_7_ppb_N2_O_d2375ff82c/HPST-Obrazek-3-Chromatogram-S-N-pro-32.7-ppb-N2O.webp" alt="HPST: Obrázek 3: Chromatogram S-N pro 32.7 ppb N2O"/>
Ke zvýšení citlivosti ECD detekce byl použit upravený make-up plyn, argon s 5% obsahem CH₄. Využitím této směsi bylo docíleno zvýšení citlivosti detekce N₂O, a to přibližně až na 32 ppb při zachování dobrého poměru signálu k šumu (S/N, signal-to-noise) (obrázek 3).
Totožný GC systém byl následně využit pro analýzu reálných vzorků. Během tohoto experimentu byl měřeným vzorkem laboratorní vzduch. Výsledný chromatogram můžete vidět na obrázku 4. Zachycené koncentrace byly 473 ppb pro N₂O, 2.7 ppm pro CH₄ a 380 ppm pro CO₂.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Obrazek_4_Chromatogram_realneho_vzorku_a01893f421/HPST-Obrazek-4-Chromatogram-realneho-vzorku.webp" alt="HPST: Obrázek 4: Chromatogram reálného vzorku"/>
Tento systém lze využít i pro analýzu SF₆ oddálením momentu odvětrání na ventilu 1 (valve 1). SF₆ pak prochází na kolonu 1 (předkolona, column 1). Obrázek 5 ukazuje chromatogram SF₆ pro přibližnou koncentraci 0.5 ppb při dávkovaném objemu vzorku 1 ml.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Obrazek_5_Chromatogram_SF_6_f033e01ed7/HPST-Obrazek-5-Chromatogram-SF6.webp" alt="HPST: Obrázek 5: Chromatogram SF6"/>
Výše popsaný jednoduchý ventilový systém <a href="https://hpst.cz/plynova-chromatografie/plynove-chromatografy/gc-agilent-8890">Agilent 8890</a> je spolehlivým a přesným instrumentem pro analýzu skleníkových plynů, ale i jiné aplikace stanovující plynné směsi o složení CO₂, CH₄, N₂O, a SF₆. Podobných ventilových analyzérů Agilent nabízí celou škálu. Tyto systémy splňují požadavky naprosté většiny průmyslových aplikací. V případě zájmu se na nás neváhejte obrátit, bezpochyby najdeme optimální konfiguraci i pro vaše vzorky.
<blockquote>
Pro Vaše dotazy kontaktujte: Daniel Sander, Produktový specialista (GC, generátory plynů Peak Scientific) (Tel. : 724 805 278, E-mail: daniel.sander@hpst.cz)
</blockquote>

Simultánní analýza skleníkových plynů pomocí GC Agilent

Jaké aplikační nebo technické možnosti přinášejí <a href="https://gcms.cz/products?category=1&amp;distributorItems=37&amp;manufacturerItems=10">nejnovější modely plynových chromatografů</a> nebo jejich spojení s <a href="https://gcms.cz/products?category=5&amp;distributorItems=37&amp;manufacturerItems=10">hmotnostními spektrometry</a> a dalšími periferiemi např. pro dávkování široké škály vzorků analyzovaných v oblasti <a href="https://gcms.cz/products?distributorItems=37&amp;manufacturerItems=10">plynové chromatografie</a>?
Zapomínat nesmíme ani na nejnovější <a href="https://gcms.cz/products?category=7&amp;distributorItems=37&amp;manufacturerItems=10">chromatografické GC kolony</a> nebo spotřební materiál, který dokáže nejednou Váš aplikační požadavek vyřešit lépe, nebo Vám ulehčit každodenní rutinu více, než ten nejvýkonnější hardware.
Podívejte se na trendy a novinky v dostupné literatuře z prvního pololetí 2022 od Agilent Technologies.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Lab_Rulez_Prehled_GC_a_GCMSD_aplikaci_od_Agilent_Technologies_H12022_47e7a2956e/LabRulez-Prehled-GC-a-GCMSD-aplikaci-od-Agilent-Technologies-H12022.webp" alt="LabRulez: Přehled GC a GCMSD aplikací od Agilent Technologies H1/2022"/>
<h3>Plynová chromatografie (GC) 👉 <a href="https://gcms.cz/library?from=2022&amp;instrumentationItems=1&amp;mainauthorItems=10&amp;to=2022">Knihovna (15)</a></h3>
<ul>
<li>Analysis of Gas Products from Carbon Dioxide Use Technologies by Gas Chromatography (Aplikace | 2022)
</li>
<li>Examination of 624-type GC Column Phases and its Performance for Amine Analysis (Aplikace | 2022)
</li>
<li>GC Troubleshooting in the Palm of Your Hand (Brožury a specifikace | 2022)
</li>
<li>Noble Gases Analysis Using the Agilent 990 Micro GC (Aplikace | 2022)
</li>
<li>Agilent 8890, 8860, and 9000 GC Browser Interface: A Tutorial (Technické články | 2022)
</li>
<li>GC Intelligence: User-Guided Troubleshooting (Technické články | 2022)
</li>
<li>63Nickel Electron Capture Detector Radioactive Leak Wipe Test Kit Instructions (Manuály | 2022)
</li>
<li>Handbook of ICP-QQQ Applications using the Agilent 8800 and 8900 (Příručky | 2022)
</li>
<li>Selecting a GC Liner to Decrease Column Trim Frequency (Technické články | 2022)
</li>
<li>Ballooning helium costs keeping you up at night? Try Hydrogen and Nitrogen as Alternative Carrier Gases (Prezentace | 2022)
</li>
<li>Get Your GC Methods In-Line with the Correct Liner (Prezentace | 2022)
</li>
<li>How to Combat the Helium Shortage: Making the Switch from Helium to Hydrogen or Nitrogen (Prezentace | 2022)
</li>
<li>Lost and Found: Troubleshooting Missing Peaks in GC Analysis (Prezentace | 2022)
</li>
<li>Ask the Agilent GC and GC/MS Experts (Prezentace | 2022)
</li>
<li>Reliable and Dependable GC Method Development (Prezentace | 2022)
</li>
</ul>
<h3>Hmotnostní spektrometrie s jednoduchým kvadrupólem (GC/MSD) 👉 <a href="https://gcms.cz/library?from=2022&amp;instrumentationItems=3-14&amp;mainauthorItems=10&amp;to=2022">Knihovna (9)</a></h3>
<ul>
<li>MEE Method HJ605 Using the Teledyne Tekmar Atomx XYZ P&amp;T and Agilent GC/MSD to Determine Volatile Organic Compound Concentration in Soil Matrices (Aplikace | 2022)
</li>
<li>MEE Method HJ639 Using the Teledyne Tekmar Atomx XYZ P&amp;T and Agilent GC/MSD to Determine Volatile Organic Compound Concentration in Water (Aplikace | 2022)
</li>
<li>Polychlorinated Biphenyls (PCB) Analysis in Environmental Samples by GC/MS (Příručky | 2022)
</li>
<li>Analysis of Semivolatile Organic Compounds Using Hydrogen Carrier Gas and the Agilent HydroInert Source by Gas Chromatography/Mass Spectrometry (Aplikace | 2022)
</li>
<li>Agilent Inert Plus GC/MS System with HydroInert Source (Technické články | 2022)
</li>
<li>Agilent 5977C GC/MSD (Brožury a specifikace | 2022)
</li>
<li>Use Hydrogen Carrier to Analyze More Compounds (Ostatní | 2022)
</li>
<li>ASMS: A Novel EI Source Optimized for Use with Hydrogen Carrier Gas in GC/MS and GC/MS/MS (Postery | 2022)
</li>
<li>ASMS: Quantitative screening of 68 Semi-volatile Organic Compounds residues in water with Automated Liquid-Liquid Extraction and large volume injection by GC-MS (Postery | 2022)
</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_GCMS_hmotnostni_spektromery_Agilent_5977_C_GC_MSD_7010_C_7000_E_GC_QQQ_7250_Q_TOF_34e1b8ea42/HPST-GCMS-hmotnostni-spektromery-Agilent-5977C-GC-MSD-7010C-7000E-GC-QQQ-7250-Q-TOF.webp" alt="HPST: GC/MS hmotnostní spektromery Agilent 5977C GC/MSD, 7010C, 7000E GC/QQQ, 7250 Q-TOF"/>
<h3>Tandemová hmotnostní spektrometrie s trojitým kvadrupólem (GC/QQQ) 👉 <a href="https://gcms.cz/library?from=2022&amp;instrumentationItems=15-3&amp;mainauthorItems=10&amp;to=2022">Knihovna (17)</a></h3>
<ul>
<li>Trace-level Quantification of Multiclass Emerging Disinfection Byproducts (DBPs) in Wastewater‑Impacted Waters (Aplikace | 2022)
</li>
<li>Determination of Multiclass, Multiresidue Pesticides in Berries (Aplikace | 2022)
</li>
<li>Ethylene Oxide &amp; 2-Chloroethanol analysis in Foods using Triple Quadrupole GC/MS/MS (Brožury a specifikace | 2022)
</li>
<li>Agilent 7000E and 7010C triple quadrupole GC/MS (Brožury a specifikace | 2022)
</li>
<li>Analysis of Semivolatile Organic Compounds with Hydrogen Carrier Gas and HydroInert Source by Gas Chromatography/Triple Quadrupole Mass Spectrometry (GC/MS/MS) (Aplikace | 2022)
</li>
<li>Agilent Inert Plus GC/MS System with HydroInert Source (Technické články | 2022)
</li>
<li>Five Keys to Unlock Maximum Performance in the Analysis of Over 200 Pesticides in Challenging Food Matrices by GC/MS/MS (Aplikace | 2022)
</li>
<li>Use Hydrogen Carrier to Analyze More Compounds (Ostatní | 2022)
</li>
<li>ASMS: A Novel EI Source Optimized for Use with Hydrogen Carrier Gas in GC/MS and GC/MS/MS (Postery | 2022)
</li>
<li>Food Testing &amp; Environmental Analysis - Application Compendium (Příručky | 2022)
</li>
<li>Five Keys to Unlock Maximum Performance in the Analysis of Over 200 Pesticides in Challenging Food Matrices by GC/MS/MS (Aplikace | 2022)
</li>
<li>ASMS: Simplifying Persistent Issues with Dioxins Analysis in the Environment using GC/MS/MS (Postery | 2022)
</li>
<li>ASMS: Optimized Analysis of Semivolatile Organic Compounds (sVOCs) with EPA 8270E Using GC Triple Quadrupole MS (GC/TQ) (Postery | 2022)
</li>
<li>ASMS: A Robust High-Throughput GC/MS/MS Analysis of 203 Pesticides in Fresh Produce Under 10 Minutes with Helium and Hydrogen Carrier Gasses (Postery | 2022)
</li>
<li>ASMS: Methodology Advances in the Sensitive Identification and Quantitation of 1,4- Dioxane in Consumer Products by SPME- EI-GC/MS/MS (Postery | 2022)
</li>
<li>A Fast and Robust GC/MS/MS Analysis of 203 Pesticides in 10 Minutes in Spinach (Aplikace | 2022)
</li>
<li>Simultaneous Analysis of Ethylene Oxide and 2-Chloroethanol in Sesame Seeds and Other Food Commodities: Challenges and Solutions (Aplikace | 2022)
</li>
</ul>
<h3>Tandemová hmotnostní spektrometrie s vysokým rozlišením a přesnou hmotou (GC/Q-TOF) 👉 <a href="https://gcms.cz/library?from=2022&amp;instrumentationItems=3-16&amp;mainauthorItems=10&amp;to=2022">Knihovna (2)</a></h3>
<ul>
<li>ASMS: Comprehensive Accurate Mass Metabolomics EI Library and Validation of the Data Processing Workflows Using Human Plasma Samples (Postery | 2022)
</li>
<li>ASMS: Accurate Mass Library for Natural Products Based on Compounds Identified in Hemp CBD Oil (Postery | 2022)
</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Reseni_Agilent_Technologies_pro_maxialni_inertnost_vsech_cest_ve_styku_se_vzorkem_v_plynove_chromatografii_babf2bfc9f/HPST-Reseni-Agilent-Technologies-pro-maxialni-inertnost-vsech-cest-ve-styku-se-vzorkem-v-plynove-chromatografii..webp" alt="HPST: Řešení Agilent Technologies pro maxiální inertnost všech cest ve styku se vzorkem v plynové chromatografii"/>

Přehled GC a GC/MSD aplikací od Agilent Technologies H1/2022

Plynové chromatografy (GC) a jejich spojení s hmotnostními detektory (GC/MS) a dalšími technikami se využívá v mnoha oblastech pro separaci, identifikaci a kvantifikaci širokého spektra analytů. V následujícím přehledu Vám přinášíme ty nejnovější rozdělené dle různých oblastí použití.
<blockquote>
💡<a href="https://gcms.cz/library?from=2023&amp;mainauthorItems=10&amp;to=2023">Všechny aplikace naleznete přímo ke stažení v knihovně LabRulezGCMS.</a> Pro přesnější selekci vyberte typ instrumentace nebo oblasti použití, která Vás zajímá. Vyhledávejte v téměř 3 000 GC a GC/MS dokumentech Agilent Technologies dostupných v knihovně.
</blockquote>
<h3>Životní prostředí (2)</h3>
<ul>
<li>Analysis of PAHs Using GC/MS with Hydrogen Carrier Gas and the Agilent HydroInert Source (Aplikace | 2023)
</li>
<li>GC/MS/MS Analysis of PAHs with Hydrogen Carrier Gas (Aplikace | 2023)
</li>
</ul>
<h3>Průmysl a chemie (3)</h3>
<ul>
<li>Analysis of Carbonate Esters and Additives in Battery Electrolyte Using Agilent 8860 GC (Aplikace | 2023)
</li>
<li>Analysis of Sulfur Compounds in High-Purity Hydrogen (Aplikace | 2023)
</li>
<li>Coal Mine Gas Analysis with the Agilent 990 Micro GC (Aplikace | 2023)
</li>
</ul>
<blockquote>
<ul>
<li>💡 <a href="https://gcms.cz/products/639">Agilent GC/MSD 5977C</a></li>
<li>💡 <a href="https://gcms.cz/products/641">Agilent 7010C Triple Quadrupole GC/MS System</a></li>
<li>💡 <a href="https://gcms.cz/products/642">Agilent 7000E Triple Quadrupole GC/MS System</a></li>
<li>💡 <a href="https://gcms.cz/products/116">Agilent 7250 GC/Q-TOF System</a></li>
</ul>
</blockquote>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_GCMS_hmotnostni_spektromery_Agilent_5977_C_GC_MSD_7010_C_7000_E_GC_QQQ_7250_Q_TOF_34e1b8ea42/HPST-GCMS-hmotnostni-spektromery-Agilent-5977C-GC-MSD-7010C-7000E-GC-QQQ-7250-Q-TOF_l.webp" alt="HPST: GC/MS hmotnostni spektromery Agilent 5977C GC/MSD, 7010C GC/QQQ a 7250-Q-TOF"/>
<h3>Potraviny a zemědělství (4)</h3>
<ul>
<li>Determination of Over 300 Pesticides in Cinnamon (Aplikace | 2023)
</li>
<li>Determination of Over 300 Pesticides in Tobacco (Aplikace | 2023)
</li>
<li>Determination of Over 300 Pesticides in Cayenne Pepper (Aplikace | 2023)
</li>
<li>Fully Automated Sample Preparation for the Analysis of Terpenes in Cannabis Flower (Aplikace | 2023)
</li>
</ul>
<h3>Metabolomika (1)</h3>
<ul>
<li>Comprehensive Accurate Mass Metabolomics Library and Its Evaluation in Targeted and Nontargeted Data Analysis Workflows (Aplikace | 2023)</li>
</ul>
<blockquote>
<ul>
<li>💡 <a href="https://gcms.cz/products/5">Agilent 8860 GC System</a></li>
<li>💡 <a href="https://gcms.cz/products/1">Agilent 8890 GC System</a></li>
<li>💡 <a href="https://gcms.cz/products/6">Agilent Intuvo 9000 GC System</a></li>
<li>💡 <a href="https://gcms.cz/products/7">Agilent 990 Micro GC System</a></li>
</ul>
</blockquote>
<h3>Farmaceutická analýza (2)</h3>
<ul>
<li>Screening of Nitrosamine Impurities in Drug Products and Drug Substances Using Agilent GC/MS/MS Instrumentation (Aplikace | 2023)
</li>
<li>Analysis of USP &lt;467&gt; Residual Solvents Using the Agilent 8697XL Headspace Sampler and Agilent 8890 GC (Aplikace | 2023)
</li>
</ul>
<h3>Ostatní (9)</h3>
<ul>
<li>GC separation troubleshooting (Prezentace | 2023)
</li>
<li>Demystifying Valve Gas Chromatography (Prezentace | 2023)
</li>
<li>Making Better Connections in GC and GC/MS Systems (Prezentace | 2023)
</li>
<li>Advanced Utilization of the Custom Calculator Tool for OpenLab CDS: An Oligonucleotide Example (Technické články | 2023)
</li>
<li>Solid Phase Microextraction Fundamentals (Technické články | 2023)
</li>
<li>SPME Automated Sampling Requirements (PAL3 II SPME ordering) (Příručky | 2023)
</li>
<li>Agilent 8697 Headspace Sampler - Data Sheet (Brožury a specifikace | 2023)
</li>
<li>Agilent Intuvo 9000 Gas Chromatograph Site Preparation Checklist (Manuály | 2023)
</li>
<li>Agilent ChemVista software with extensive, comprehensive integrated libraries (Brožury a specifikace | 2023)
</li>
</ul>

Přehled GC a GC/MS aplikací Agilent Technologies 01-05/2023

<a href="https://gcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=THC">THC</a> je hlavní psychoaktivní látkou v rostlinách konopí. Například v Německu stačí pro odebrání řidičského průkazu stanovení koncentrace THC nad 1 ng/ml v krevním séru. Po konzumaci je THC metabolizováno na aktivní metabolit 11-hydroxy- Δ9-Tetrahydrocannabinol (THC-OH) a dále pak na neaktivní metabolit 11-nor-9-carboxy- Δ9-Tetrahydrocannabinol (THC-COOH). Ze stanovených koncentrací metabolitů THC lze zjistit další zajímavé informace o užití THC – vysoká koncentrace THC-OH ukazuje na nedávné užití konopí, vysoký obsah THC-COOH pak indikuje časté užívání konopí.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Altium_Obrazek_1_System_pro_automatickou_analyzu_THC_a_jeho_metabolitu_2a040c8d8e/Altium-Obrazek-1-System-pro-automatickou-analyzu-THC-a-jeho-metabolitu.jpg" alt="Altium: Obrázek 1 - Systém pro automatickou analýzu THC a jeho metabolitů"/>
<h3>Instrumentace</h3>
Příprava vzorků byla provedena na aparatuře Gerstel sestavené z <a href="https://gcms.cz/products/33">MultiPurpose Sampler (MPS)</a> v provedení dual head, vybaveném modulem Solid Phase Extraction (SPE) a MultiPosition Evaporation Station (mVAP). Samotné měření bylo provedeno na <a href="https://gcms.cz/products/217">plynovém chromatografu Agilent 7890</a> a <a href="https://gcms.cz/products/2">hmotnostním spektrometru Agilent 5977</a>. Levá věž MPS byla vybavena stříkačkou o objemu 10 μL pro nástřik do inletu, zatímco pravá věž byla opatřena stříkačkou o objemu 2.5 mL pro dávkování všech rozpouštědel, kromě přídavku derivatizačního činidla N-Methyl-N-(trimethylsilyl) trifluoroacetamidu (MSTFA). Celý proces byl řízen kontrolním software Gerstel Maestro, který lze snadno integrovat do Agilent Chemstation a <a href="https://gcms.cz/products/23">Agilent MassHunter</a>. Nástřik vzorků byl realizován prostřednictvím horkého split/splitless intletu na kolonu.
<h3>Výsledky a diskuse</h3>
Jedním z kritérií bylo porovnání výsledků stávající a nové automatické metody. K tomuto účelu bylo analyzováno 5 vzorků krevního séra s přídavkem standardu THC na koncentrační úroveň blízkou detekčnímu limitu metody. Z grafu na Obrázku 3 vyplývá, že výsledky koncentrací THC jsou v souladu pro obě metody.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Altium_Obrazek_3_Porovnani_analyzy_vysledku_THC_ziskanych_validovanou_rutinni_metodou_a_automatickou_metodou_Gerstel_63d9dfa2d9/Altium-Obrazek-3-Porovnani-analyzy-vysledku-THC-ziskanych-validovanou-rutinni-metodou-a-automatickou-metodou-Gerstel.jpg" alt="Altium: Obrázek 3 - Porovnání analýzy výsledků THC získaných validovanou rutinní metodou a automatickou metodou Gerstel"/>
Dalším důležitým kritériem pro hodnocení automatické metody bylo stanovení carry-over. Bylo měřeno 6 vzorků krevního séra s přídavkem standardu na koncentrační úrovni 60 ng/ml THC, THC-OH a 600 ng/ml THC-COOH. Po každém vzorku byl změřen blank čistého séra. Jak je patrné z Obrázků 4a, 4b a 4c, u žádného ze stanovovaných analytů nebyl zjištěn měřitelný carry-over. Použitá kalibrace byla provedena nástřikem rozpouštědlových standardů. Toto bylo možno provést jednak díky přítomnosti deuterovaných interních standardů pro každý analyt, jednak díky porovnání kalibračních křivek získaných měřením rozpouštědlové a matriční kalibrační řady (oba typy poskytovaly shodné křivky).
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Altium_Obrazek_4_Opakovane_mereni_blanku_po_nastriku_vzorku_THC_THC_OH_a_THC_COOH_5777c170e2/Altium-Obrazek-4-Opakovane-mereni-blanku-po-nastriku-vzorku-THC-THC-OH-a-THC-COOH.jpg" alt="Altium: Obrázek 4 - Opakované měření blanku po nástřiku vzorku: a) THC o koncentraci 60 ng/ml, b) THC-OH o koncentraci 60 ng/ml, c) THC-COOH o koncentraci 600 ng/ml"/>
<h3>Pracovní postup a příprava vzorků</h3>
<h5>Manuální přípravné kroky</h5>
<ul>
<li>500 μL vzorku se naředí 500 μL 10% kyseliny octové a 50 μL roztoku interního standardu
</li>
<li>Pokud je ve vzorku viditelná sraženina, vzorek se odstředí (tento krok lze také automatizovat)
</li>
</ul>
<h5>Automatizované přípravné kroky</h5>
<ul>
<li>SPE kolonka (1 mL, 100 mg C18ec) se nakondicionuje 2 ml každého rozpouštědla v tomto pořadí
<ul>
<li>Methanol</li>
<li>Deionizovaná voda</li>
<li>0.1 M kyselina octová</li>
</ul>
</li>
<li>Celý vzorek (0.5 ml krevního séra) se převede na nakondicionovanou kolonku
</li>
<li>Následně se SPE kolonka se vzorkem promyje 2 ml rozpouštědel v tomto pořadí
<ul>
<li>0.1 M kyselina octová</li>
<li>Směs acetonitrilu (60/40 v/v)</li>
</ul>
</li>
<li>SPE kolonka se vysuší proudem dusíku po dobu 1 minuty
</li>
<li>Analyty se eluují 2 x 200 μL acetonitrilu
</li>
<li>Eluát se odpaří dosucha při 60 °C, 100 mBar a třepání (250 rpm) po dobu 5 min v modulu mVAP
</li>
<li>Odpařený vzorek se rozpustí ve 25 μL MSTFA při okolní teplotě, stálém míchání (750 rpm) po dobu 5 min
</li>
<li>3 μL alikvot se nastříkne do horkého inletu, kde proběhne simultánní silylace analytů a transfer na GC kolonu
</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Altium_Obrazek_2_Pracovni_postup_modulu_Gerstel_SPE_12657b0d2b/Altium-Obrazek-2-Pracovni-postup-modulu-Gerstel-SPE.jpg" alt="Altium: Obrázek 2 - Pracovní postup modulu Gerstel SPE"/>
<h3>Podmínky GC/MS analýzy</h3>
<ul>
<li>MPS: 3 μL injection volume</li>
<li>Teplota inletu: 280 °C</li>
<li>Inlet Liner: Deactivated, single taper (Agilent)</li>
<li>Injection Mode: Splitless, 2 min</li>
<li>Pneumatics: 134.5 kPa He, constant pressure</li>
<li>Oven:<ul>
<li>160 °C (1 min); 10 °C/min;</li>
<li>180 °C (8 min); 5 °C/min;</li>
<li>220 °C (4 min); 15 °C/min;</li>
<li>270 °C (5 min); 10 °C/min;</li>
<li>300 °C (5 min)</li>
</ul>
</li>
<li>Post Run: 325 °C (2 min), 350 kPa</li>
<li>Kolona: Agilent, VF-1ms 25 m, di = 0.2 mm, df = 0.33 μm</li>
<li>Transfer Line: 300 °C</li>
<li>Source Temp.: 230 °C</li>
<li>MSD Mode: Selected ion monitoring (SIM)</li>
<li>SIM Masses:<ul>
<li>m/z (THC): 386, 371, 303</li>
<li>m/z (THC-D3): 389, 374, 306</li>
<li>m/z (THC-OH): 371, 474, 459</li>
<li>m/z (THC-OH-D3): 374, 477, 462</li>
<li>m/z (THC-COOH): 371, 473, 488</li>
<li>m/z (THC-COOH-D3): 374, 476, 491</li>
</ul>
</li>
</ul>
Po srovnání manuální a automatické metody a po stanovení carry-over byly odhadnuty základní validační charakteristiky – limit detekce, limit kvantifikace, reprodukovatelnost, mezi-denní reprodukovatelnost a účinnost extrakce – viz Tabulka 1.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Altium_Tabulka_1_Namerene_validacni_charakteristiky_pro_metodu_automatickeho_stanoveni_THC_a_jeho_metabolitu_v_krevnim_seru_78c31d3398/Altium-Tabulka-1-Namerene-validacni-charakteristiky-pro-metodu-automatickeho-stanoveni-THC-a-jeho-metabolitu-v-krevnim-seru.jpg" alt="Altium: Tabulka 1 - Naměřené validační charakteristiky pro metodu automatického stanovení THC a jeho metabolitů v krevním séru"/>
<h3>Závěr</h3>
Byla vyvinuta a validována plně automatická metoda pro stanovení THC a jeho hlavních metabolitů v krevním séru.
<h5>Bylo dosaženo</h5>
<ul>
<li>limitu kvantifikace pod 1 ng/mL pro THC a THC-OH, pod 5 ng/ml pro THC-COOH</li>
<li>reprodukovatelnosti výsledků měření v rozmezí 3.3 % – 10 %</li>
<li>extrakční účinnosti mezi 70 % - 93 %</li>
</ul>
Tyto výsledky byly dosaženy analýzou pouze 0.5 ml vzorku krevního séra (oproti standardní manuální metodě, kde se používá celý mililitr).

Automatické stanovení Δ9-Tetrahydrocannabinolu (THC) a jeho metabolitů v krevním séru pomocí SPE-GC/MS

Přehled aktualizovaných GC/GCMS aplikačních poznámek k analýze pesticidů

Webináře

Aplikace

Akademie

Osobnosti

Plasty

Životní prostředí

Potraviny

Vody

Zdraví

Přednáška

Vědecký článek

Rozhovor

Toxikologie

Popularizace

Věda a výzkum

Software

Covid-19

Kariéra

Článek

Laboratoře

Různé

Produkt

Video

Poster

Nejbližší akce

Typ novinky

Zaměření

Je autorizovaným distributorem společnosti Agilent Technologies pro Českou republiku v oblastech chromatografie (GC, HPLC, UHPLC, kapilární elektroforéza) a hmotnostní spektrometrie (GC/MS, LC/MS, CE/MS), disolučních aparátů, molekulární (UV-Vis, UV-Vis-NIR, fluorescence, FTIR analyzátory a mikroskopy) a atomové spektroskopie (ICP-OES, ICP-MS, AAS), a v neposlední řadě také v oblasti molekulární biologie a genomiky (analýza nukleových kyselin a proteinů, microarray skenery a skla, PCR & RT-PCR, qPCR, řešení pro NGS, reagencie pro mutagenezi a klonování, sondy FISH a další).

Altium International

Odběry vzorků 2025

77. Zjazd chemikov 2025

VIII. Setkání uživatelů FTIR a Ramanových spektrometrů BRUKER

Cutting through pesticide residues and heavy metals

From Peaks to Insights: Navigating Environmental Analysis with Weck Laboratories using GC/MS/MS Instrumentation

Amplifying the Invisible: Advanced Spectroelectrochemistry with EC-SERS

GCMS novinky typu aplikace | LabRulez GCMS